技术诀窍
荧光光谱
在波长 lex 光的辐照下,荧光染料的某些电子会上升到一个更高的能量级别。在非常短的静置时间内,它们损失了能量,并在发射较长的波长 lem>lex 时下降到最初的水平。波长之间的差别称为斯托克斯频移。

在多光子激发中,将具备 n 倍激励波长的多个光子的能量加在一起,使电子升到更高的能量级别。

激发荧光能量图。
单光子激励(左),多光子激励(右)
共焦原理
荧光源
荧光光谱
发射分隔
Excitation efficiency and emission intensity as a function of excitation wavelength (schematic)