ZEISS Elyra 7
Producto

ZEISS Elyra 7

Captura de imágenes en directo con una resolución sin precedentes que llega hasta los detalles moleculares

ZEISS Elyra 7 incluye una gran cantidad de técnicas de microscopía para satisfacer sus necesidades en experimentos a distintas escalas, adaptando de manera óptima los requisitos de resolución, velocidad y sensibilidad a sus exigentes muestras. Emplee SIM Apotome para un seccionamiento óptico rápido, Lattice SIM para la captura de imágenes con superresolución, la reconstrucción de imágenes de SIM² para una resolución de excelencia de hasta 60 nm y SMLM, y TIRF para investigaciones a nivel molecular. Puede combinar estas técnicas para multiplicar la información obtenida de su muestra y correlacionar los datos adquiridos.

  • Consiga un seccionamiento óptico de calidad excepcional.
  • Resuelva estructuras de hasta 60 nm.
  • Explore detalles moleculares con SMLM.
  • Observe la dinámica de las células vivas con hasta 255 fps.
Proyección codificada por colores de células COS-7 marcadas mediante inmunofluorescencia con anti-α-tubulina Alexa 488.

Proyección codificada por colores de células COS-7 marcadas mediante inmunofluorescencia con anti-α-tubulina Alexa 488.

Proyección codificada por colores de células COS-7 marcadas mediante inmunofluorescencia con anti-α-tubulina Alexa 488.

Las imágenes demuestran las excelentes capacidades de seccionamiento del algoritmo de reconstrucción de imágenes de SIM².

Objetivo: Plan-Apochromat 100× / 1,57 aceite

Excelente resolución con Lattice SIM²

Con SIM², un novedoso algoritmo de reconstrucción de imágenes que eleva la tecnología SIM a un nuevo nivel, ahora puede duplicar la resolución SIM convencional. Lattice SIM² incluye una excelente supresión de la luz desenfocada, lo cual le proporciona el seccionamiento más nítido de la microscopía de widefield, incluso para muestras con elevada dispersión. La reconstrucción de imágenes de SIM² recompone con solidez todos los datos captados con iluminación estructurada de Elyra 7, con artefactos mínimos, para muestras vivas y fijadas.

Leyenda: las imágenes demuestran las excelentes capacidades de seccionamiento del algoritmo de reconstrucción de imágenes de SIM².

Velocidad y eficiencia para sus experimentos

Además de duplicar la resolución SIM clásica, SIM² le ofrece una captura de imágenes cuidadosa de los especímenes vivos y fijados a altas velocidades de hasta 255 fps. Combine SIM² con los modos Burst y Leap para que la captura de imágenes de superresolución sea más rápida que nunca. Con el modo SIM Apotome se puede lograr una adquisición sin pérdidas, lo que significa que para cada imagen reconstruida solo se necesita una imagen bruta. O puede usar Elyra 7 Duolink para captar simultáneamente imágenes de dos estructuras con distinta tinción y usar los múltiples colores para potenciar aún más la resolución.

Leyenda: La captura de imágenes a cámara rápida del retículo endoplasmático (Calreticulin-tdTomato) de células COS-7 revela cambios estructurales muy dinámicos.

SMLM: Células A6 de Xenopus laevis (células epiteliales de riñón).

SMLM: Células A6 de Xenopus laevis (células epiteliales de riñón).

SMLM: Células A6 de Xenopus laevis (células epiteliales de riñón).

Gp120, un complejo de proteína del poro nuclear dispuesta en una simetría de orden ocho, se marcó con Alexa Fluor 647.

Flexibilidad para su investigación

Elyra 7 gestiona prácticamente cualquier tipo de muestra, incluidas estructuras celulares fotosensibles, C. elegans y plantas con dispersión o secciones tisulares de hasta 100 µm de grosor. Elyra 7 incluye varias técnicas de microscopía: Lattice SIM², SIM² Apotome, DIC widefield, SMLM y TIRF. Puede correlacionar imágenes de la misma muestra adquiridas mediante cualquiera de estas técnicas, o todas ellas, para multiplicar la información de la que dispone sobre su espécimen. Incluso puede combinar Elyra 7 con una gran variedad de sistemas de captura de imágenes, como LSM con Airyscan o la microscopía electrónica de barrido en un flujo de trabajo correlativo.

Leyenda: SMLM: Células A6 de Xenopus laevis (células epiteliales de riñón).

La tecnología que hay detrás

Lattice SIM: captura de imágenes de células vivas en 3D de superresolución

En Lattice SIM, la zona de la muestra se ilumina con un patrón de puntos reticulares, en lugar de líneas de cuadrícula como en el SIM convencional. Esto da lugar a un drástico aumento en la velocidad de captura de imágenes. Adicionalmente, el patrón reticular proporciona un mayor contraste para permitir una reconstrucción más sólida de la imagen. Como la eficiencia de muestreo de la iluminación de patrón reticular se duplica en comparación con el método SIM clásico, se necesita una menor dosis de láser para iluminar la muestra. Esta iluminación reticular hace que SIM sea una técnica predilecta para la captura de imágenes de células vivas. La gran mejora de la eficiencia fotónica de la iluminación reticular le permite aumentar la velocidad de captura de imágenes, a la vez que consigue un mayor contraste y una menor dosis de luz.

Las imágenes de células COS-7 teñidas con anti-α-tubulina Alexa fluor 488 se procesaron con algoritmos SIM convencionales basados en un filtro Wiener generalizado y con la novedosa reconstrucción SIM². Las imágenes muestran una mejora de la resolución para SIM² en comparación con SIM. Objetivo: Plan-Apochromat 63× / 1,4 aceite.
Las imágenes de células COS-7 teñidas con anti-α-tubulina Alexa fluor 488 se procesaron con algoritmos SIM convencionales basados en un filtro Wiener generalizado y con la novedosa reconstrucción SIM². Las imágenes muestran una mejora de la resolución para SIM² en comparación con SIM. Objetivo: Plan-Apochromat 63× / 1,4 aceite.

Las imágenes de células COS-7 teñidas con anti-α-tubulina Alexa fluor 488 se procesaron con algoritmos SIM convencionales basados en un filtro Wiener generalizado y con la novedosa reconstrucción SIM². Las imágenes muestran una mejora de la resolución para SIM² en comparación con SIM. Objetivo: Plan-Apochromat 63× / 1,4 aceite.

Las imágenes de células COS-7 teñidas con anti-α-tubulina Alexa fluor 488 se procesaron con algoritmos SIM convencionales basados en un filtro Wiener generalizado y con la novedosa reconstrucción SIM². Las imágenes muestran una mejora de la resolución para SIM² en comparación con SIM. Objetivo: Plan-Apochromat 63× / 1,4 aceite.

SIM²: duplique la resolución de SIM

SIM² es el novedoso y revolucionario algoritmo de reconstrucción de imágenes que aumenta la resolución y la calidad del seccionamiento de los datos de microscopía con iluminación estructurada. SIM² es compatible con todos los modos de captura de imágenes SIM de Elyra 7 y está completamente integrado en el software ZEN.

A diferencia de los algoritmos de reconstrucción convencionales, SIM² es un algoritmo de reconstrucción de imágenes en dos pasos. En primer lugar se realiza la combinación del orden, la eliminación del ruido y el filtrado de supresión de frecuencias. Todos los efectos resultantes de estas manipulaciones de las imágenes digitales se trasladan a una función de dispersión de punto (PSF) SIM digital. La deconvolución repetitiva subsiguiente usa esta misma PSF. De forma similar a las ventajas del uso de la PSF experimental para la deconvolución de datos de microscopía basados en hardware, el algoritmo SIM² es superior a los métodos convencionales de reconstrucción de imágenes en un paso en términos de resolución, seccionamiento y solidez.

Arquitectura de los complejos sinaptonémicos con triple marcado de testículos de ratón visualizados mediante inmunomarcaje de SYCP3 con SeTau647, SYCP1-C con Alexa 488 y SYCP1-N con Alexa 568 y modo Lattice SIM².
Arquitectura de los complejos sinaptonémicos con triple marcado de testículos de ratón visualizados mediante inmunomarcaje de SYCP3 con SeTau647, SYCP1-C con Alexa 488 y SYCP1-N con Alexa 568 y modo Lattice SIM². Marie-Christin Spindler, AG Prof Ricardo Benavente, Biocentro de la Universidad de Würzburg.
Marie-Christin Spindler, AG Prof Ricardo Benavente, Biocentro de la Universidad de Würzburg.

Arquitectura de los complejos sinaptonémicos con triple marcado de testículos de ratón visualizados mediante inmunomarcaje de SYCP3 con SeTau647, SYCP1-C con Alexa 488 y SYCP1-N con Alexa 568 y modo Lattice SIM².

 Marie-Christin Spindler, AG Prof Ricardo Benavente, Biocentro de la Universidad de Würzburg.
Marie-Christin Spindler, AG Prof Ricardo Benavente, Biocentro de la Universidad de Würzburg.

Arquitectura de los complejos sinaptonémicos con triple marcado de testículos de ratón visualizados mediante inmunomarcaje de SYCP3 con SeTau647, SYCP1-C con Alexa 488 y SYCP1-N con Alexa 568 y modo Lattice SIM².

Captura de imágenes con superresolución y múltiples colores para muestras con tinciones convencionales

Lattice SIM² le permite captar imágenes multicolor con una resolución de hasta 60 nm para muestras con tinciones convencionales. Debido a su pequeño tamaño, hasta el momento solo era posible capturar imágenes tricolor del complejo sinaptonémico usando complejos métodos como la captura de imágenes de superresolución de muestras ampliadas tres veces. Lattice SIM² resuelve dos hebras de SYCP3 (elementos laterales) además de SYCP1-C (extremo C terminal de los filamentos transversos) sin un tratamiento o tinción especial de la muestra para distancias muy por debajo de 100 nm. Y lo que es más importante, la imagen tricolor proporciona información estructural sobre las distancias entre las proteínas SYCP3 y SYCP1. Incluso dentro de la proteína SYCP1, los extremos N y C terminal con diferente marcaje se pueden ver claramente separados con una resolución de menos de 50 nm entre los dos marcadores.

Recuerdo cuando vi los primeros resultados. Solo podía reír de lo asombrado que estaba. Lo siguiente que hice fue enviar un correo electrónico a algunos usuarios clave que podrían beneficiarse de inmediato. Desde neurobiólogos tisulares hasta inmunólogos celulares y moleculares y aquellos que trabajan con levaduras o bacterias: todos se benefician ya de SIM².

Peter O‘Toole

Jefe de técnicas de imagen y citometría, Universidad de York

SIM² Apotome: comparación de imágenes de un solo plano de widefield y SIM² Apotome de células COS-7 teñidas para microtúbulos (anti-α-tubulina Alexa fluor 488, verde) y núcleos (Hoechst, azul). Objetivo: LD LCI Plan-Apochromat 25× / 0,8 Imm Corr
SIM² Apotome: comparación de imágenes de un solo plano de widefield y SIM² Apotome de células COS-7 teñidas para microtúbulos (anti-α-tubulina Alexa fluor 488, verde) y núcleos (Hoechst, azul). Objetivo: LD LCI Plan-Apochromat 25× / 0,8 Imm Corr
SIM² Apotome: comparación de imágenes de un solo plano de widefield y SIM² Apotome de células COS-7 teñidas para microtúbulos (anti-α-tubulina Alexa fluor 488, verde) y núcleos (Hoechst, azul). Objetivo: LD LCI Plan-Apochromat 25× / 0,8 Imm Corr

SIM Apotome: seccionamiento óptico flexible

SIM Apotome
La captura de imágenes de células vivas con un sistema widefield a menudo conlleva borrones desenfocados o señal de fondo. Estos efectos pueden disminuir el contraste y la resolución de sus imágenes. El modo de captura SIM Apotome de Elyra 7 utiliza iluminación estructurada para proporcionarle un seccionamiento óptico rápido con contraste nítido y elevada resolución lateral y axial.

SIM² Apotome
El modo de adquisición de SIM Apotome en combinación con el algoritmo de reconstrucción de SIM² ahora le permite afinar más la delicadeza de la captura rápida de imágenes de células vivas con un fuerte contraste y alta resolución. O también puede utilizar su nueva velocidad de seccionamiento óptico para aumentar la productividad al captar áreas grandes o elevados volúmenes de la muestra con diferentes aumentos.

Amplíe sus posibilidades

Imagen de 3D PAINT de membranas mitocondriales en BSC1 (células epiteliales del riñón).

Imagen de 3D PAINT de membranas mitocondriales en BSC1 (células epiteliales del riñón).

Imagen de 3D PAINT de membranas mitocondriales en BSC1 (células epiteliales del riñón).

La proteína de la membrana externa Tomm20 se marcó con la hebra de captura de imágenes Ultivue – I2-650. Se usó la codificación PSF remodelada para información Z para crear una imagen 3D PAINT de 1,4 µm de profundidad.

Objetivo: alpha Plan-Apochromat 63× / 1,46 aceite

Imagen de 3D PAINT de membranas mitocondriales en BSC1 (células epiteliales del riñón).

Microscopía de localización de moléculas individuales

Captura de imágenes 3D con resolución molecular

En la microscopía de localización de moléculas individuales (SMLM) solo se activa una pequeña fracción del total de moléculas fluorescentes, de modo que solo una molécula de entre muchas se encontrará activada en una única función de dispersión de punto (PSF). Esto permite determinar su centro con una precisión de localización que supera con creces la extensión de la PSF. Una vez registrada, la molécula vuelve a su estado desactivado y el ciclo de activación/desactivación se repite hasta que se capturan todas las moléculas. Las posiciones se representan en una nueva imagen para generar una imagen de superresolución. Con Elyra 7 puede usar técnicas SMLM como PALM (microscopía de localización fotoactivada), dSTORM y PAINT para lograr una precisión de localización lateral de 10-20 nm. El software ZEN reconstruirá fácilmente la imagen con sus datos.

Adicionalmente, Elyra 7 le ofrece el modo 3D SMLM basado en la tecnología PRILM. La PSF se remodela para codificar la posición Z para que, al adquirir solo un plano, se obtenga una información volumétrica de 1,4 µm de profundidad con una resolución axial de 20-40 nm. De este modo, podrá adquirir datos en 3D con una precisión molecular constante.

  • Elyra 7 Duolink con dos cámaras Hamamatsu ORCA-Fusion BT
    Elyra 7 Duolink con dos cámaras Hamamatsu ORCA-Fusion BT

    Adaptador Elyra 7 Duolink para la adquisición simultánea en dos colores con dos cámaras sCMOS (Hamamatsu ORCA-Fusion BT)

    Adaptador Elyra 7 Duolink para la adquisición simultánea en dos colores con dos cámaras sCMOS (Hamamatsu ORCA-Fusion BT)

  • Se captó simultáneamente una imagen en dos colores de una célula COS-7 con expresión del marcador del retículo endoplasmático Calreticulin-tdTomato (magenta) y del marcador mitocondrial Tomm20-mEmerald (verde). La película muestra interacciones muy dinámicas del RE y las mitocondrias.

Elyra 7 Duolink

Captura simultánea de imágenes en dos colores

Con mucha frecuencia, la investigación de muestras vivas se centra en las interacciones de las diferentes proteínas u orgánulos. La captura simultánea de imágenes de las estructuras implicadas es fundamental para entender correctamente estos procesos tan dinámicos. Equipe su ZEISS Elyra 7 con un adaptador Duolink para manejar dos cámaras sCMOS Hamamatsu ORCA-Fusion en paralelo y aproveche todas las ventajas que puede ofrecer la tecnología basada en widefield:

  • Captura simultánea real de imágenes en dos colores en todo su campo de visión sin retrasos
  • Adquisición de una instantánea en tiempo real en superresolución de una célula viva entera eligiendo un tiempo de exposición bajo
  • Mayor productividad de experimentos con células fijadas al duplicarse la información obtenida al mismo tiempo
  • Captura de imágenes de cualquier combinación posible de colores con un cruce de señales mínimo gracias a los filtros de emisión multibanda integrados
  • Adquisición de imágenes de 4 colores sin cambiar los filtros mecánicos, haciendo que sus experimentos multicolor sean aún más rápidos
  • Experimentos SMLM multicolor
Célula U2OS que expresa Rab5-mEmerald (verde) y un marcador de transporte asociado con el aparato de Golgi etiquetado con tdTomato (magenta). Adquisición bicolor simultánea con un tiempo de exposición de 1,5 ms/fase para un campo de visión de 1024 × 1024 píxeles (64 µm × 64 µm).

Burst Mode

Captura de imágenes en superresolución con hasta 255 fps

El movimiento de difusión y, en especial, el movimiento balístico de las pequeñas vesículas de las células, se puede captar solo cuando es posible la captura de imágenes de superresolución y de alto rango dinámico al mismo tiempo. Con el procesamiento Burst de los datos 2D de cámara rápida, Elyra 7 puede generar imágenes de superresolución a 255 Hz en un campo de visión grande e incluso captar simultáneamente dos colores en los modos de adquisición Lattice SIM y SIM Apotome.

Célula U2OS que expresa calreticulin-tdTomato para visualizar el retículo endoplasmático. La serie temporal muestra una proyección de intensidad máxima del juego de datos de volumen.

Leap Mode

Seccionamiento digital tres veces más rápido

El modo Leap de Elyra 7 triplica la velocidad de captura de imágenes de volumen y, al mismo tiempo, reduce la dosis de luz en su muestra. Sin dejar de captar todos los detalles más pequeños, se capta todo el volumen (18 planos) de la célula U2OS con expresión de Calreticulin-tdTomato a una velocidad de 38 volúmenes/min en el modo de adquisición Lattice SIM. Para el modo de adquisición SIM Apotome, puede esperar una velocidad de captura de imágenes de volumen hasta tres veces mayor.

Aplicaciones

ZEISS Elyra 7 en funcionamiento

  • La imagen de Lattice SIM² de células COS-7 etiquetadas con faloidina Alexa 488 se captó con el objetivo Plan-Apochromat 100× / 1,57 en aceite. Máxima proyección de intensidad de Z-stack.
  • Células COS-7 marcadas mediante inmunofluorescencia con anti-α-tubulina Alexa 488, mostradas como proyección codificada por colores.
  • La imagen de Lattice SIM² de células COS-7 etiquetadas con faloidina Alexa 488 se captó con el objetivo Plan-Apochromat 100× / 1,57 en aceite. Máxima proyección de intensidad de Z-stack.
    La imagen de Lattice SIM² de células COS-7 etiquetadas con faloidina Alexa 488 se captó con el objetivo Plan-Apochromat 100× / 1,57 en aceite. Máxima proyección de intensidad de Z-stack.

    La imagen de Lattice SIM² de células COS-7 etiquetadas con faloidina Alexa 488 se captó con el objetivo Plan-Apochromat 100× / 1,57 en aceite. Máxima proyección de intensidad de Z-stack.

    La imagen de Lattice SIM² de células COS-7 etiquetadas con faloidina Alexa 488 se captó con el objetivo Plan-Apochromat 100× / 1,57 en aceite. Máxima proyección de intensidad de Z-stack.

  • Células COS-7 marcadas mediante inmunofluorescencia con anti-α-tubulina Alexa 488, mostradas como proyección codificada por colores.
    Células COS-7 marcadas mediante inmunofluorescencia con anti-α-tubulina Alexa 488, mostradas como proyección codificada por colores.

    Células COS-7 marcadas mediante inmunofluorescencia con anti-α-tubulina Alexa 488, mostradas como proyección codificada por colores. La imagen demuestra las excelentes capacidades de seccionamiento del algoritmo de reconstrucción de imágenes de SIM². Objetivo: Plan-Apochromat 63× / 1,4 aceite

    Células COS-7 marcadas mediante inmunofluorescencia con anti-α-tubulina Alexa 488, mostradas como proyección codificada por colores. La imagen demuestra las excelentes capacidades de seccionamiento del algoritmo de reconstrucción de imágenes de SIM². Objetivo: Plan-Apochromat 63× / 1,4 aceite

Estudio de los componentes del citoesqueleto

Debido a las estructuras finas de los componentes del citoesqueleto, por ejemplo, la red de actina o los filamentos microtubulares, la captura de imágenes muy por debajo de los 100 nm a menudo se realiza con técnicas de superresolución. Lattice SIM² le permite obtener mucha más información estructural de sus muestras que las técnicas SIM convencionales. No solo funciona con una resolución de hasta 60 nm, sino que también proporciona una calidad de seccionamiento considerablemente mejor.

  • La captura simultánea de imágenes del retículo endoplasmático (Calreticulin-tdTomato, magenta) y los microtúbulos (EMTB-3xGFP, verde) en una célula COS-7 revela una interacción muy dinámica de estos orgánulos. Objetivo: Plan-Apochromat 63×/1,4 aceite
  • Se captaron imágenes de una célula U2OS viva que expresa Tomm20-mEmerald en 3D con un tamaño de paso de 110 nm. Objetivo: Plan-Apochromat 63×/1,4 aceite
  • La captura simultánea de imágenes del retículo endoplasmático (Calreticulin-tdTomato, magenta) y los microtúbulos (EMTB-3xGFP, verde) en una célula COS-7 revela una interacción muy dinámica de estos orgánulos. Objetivo: Plan-Apochromat 63× / 1,4 aceite.
  • Célula U2OS que expresa Tomm20-mEmerald. Objetivo: Plan-Apochromat 63× / 1,4 aceite.

Entendiendo los procesos biológicos

Debido a su iluminación estructural reticular única, Elyra 7 combina la captura de imágenes de alta velocidad con una increíble eficiencia lumínica, una baja dosis fotónica y gran sensibilidad. Puede observar estructuras a nivel celular, subcelular e incluso suborganular en especímenes vivos en 2D y 3D con el paso del tiempo. Independientemente de si le interesa la dinámica del movimiento mitocondrial, la fusión y la fisión o la germinación del retículo endoplasmático: Lattice SIM² de Elyra 7 le proporciona la compatibilidad necesaria con células vivas con superresolución.

  • Células LLC PK1 con expresión de H2B-mCherry (magenta) y α-tubulina mEmerald-GFP (verde). Datos mostrados como máxima proyección de intensidad de 12 planos en 3,7 µm de profundidad. La elevada sensibilidad de Elyra 7 permite captar imágenes de todo el campo de visión durante la mitosis. Objetivo: LD LCI Plan-Apochromat 25× / 0,8 Imm Corr
  • Células COS-7 con expresión del marcador del retículo endoplasmático Calreticulin-tdTomato. Datos mostrados como máxima proyección de intensidad de 12 planos en 1,4 µm de profundidad. Objetivo: Plan-Apochromat 40× / 1,4 aceite
  • Datos de intervalo de SIM² Apotome de células LLC PK1 con expresión de H2B-mCherry (magenta) y α-tubulina mEmerald-GFP (verde). Datos mostrados como máxima proyección de intensidad de 12 planos en 3,7 µm de profundidad. Objetivo: LD LCI Plan-Apochromat 25× / 0,8 Imm Corr.
  • Datos de intervalo de SIM² Apotome de células COS-7 con expresión del marcador del retículo endoplasmático Calreticulin-tdTomato. Datos mostrados como máxima proyección de intensidad de 12 planos en 1,4 µm de profundidad. Objetivo: Plan-Apochromat 40× / 1,4 aceite.

Excelente seccionamiento con increíble velocidad

SIM² Apotome es el método flexible para capturar imágenes de células vivas para experimentos que no requieren la máxima resolución espacial, pero que se basan en una excelente calidad de seccionamiento. SIM² Apotome supera a la microscopía confocal convencional en términos de resolución lateral y axial, así como velocidad de adquisición del volumen, y al mismo tiempo es muy respetuoso con la muestra. Las imágenes de gran AN (1,4) de 40× casi alcanzan las capacidades de resolución y seccionamiento de un microscopio SIM convencional, al tiempo que multiplican la velocidad de captura.

  • Imagen de volumen con función de mosaico de una sección fina de mora. Datos mostrados como máxima proyección de intensidad en 11 µm de profundidad. Tiempo de adquisición: Inferior a 2 min. Objetivo: EC Plan-Neofluar 10× / 0,3 aire. Muestra: «Maulbeere» (Mora) de TS-Optics Set Dauerpräparate Botanik 25St.
  • Imagen de volumen con función de mosaico de una sección transversal de hoja. La imagen muestra una máxima proyección de intensidad de un Z-stack. Tiempo de adquisición: Inferior a 2 min. Objetivo: EC Plan-Neofluar 10× / 0,3. Muestra: «Leaf» (Hoja) de TS-Optics Set Dauerpräparate Botanik 25St.
  • Imagen de volumen de barrido en mosaico de SIM² Apotome de una sección fina de mora con un objetivo EC Plan-Neofluar 10× / 0,3 aire. Datos mostrados como máxima proyección de intensidad en 11 µm de profundidad. Muestra: «Maulbeere» (Mora) de TS-Optics Set Dauerpräparate Botanik 25St.
  • Imagen de volumen de barrido en mosaico de SIM² Apotome de una sección transversal de hoja con un objetivo EC Plan-Neofluar 10× / 0,3. La imagen muestra una máxima proyección de intensidad de un Z-stack. Muestra: «Leaf» (Hoja) de TS-Optics Set Dauerpräparate Botanik 25St.

Rápida captura de imágenes en mosaico de zonas muy extensas

El rendimiento de alta velocidad del modo de adquisición SIM Apotome permite una rápida captura de imágenes en mosaico de zonas muy extensas con excelente calidad de seccionamiento. La captura de una sección de mora con un tamaño de 11,1 mm² × 11 µm mediante un muestreo de Nyquist en las tres direcciones y en dos colores se llevó a cabo en menos de 2 minutos. También se lograron velocidades similares para una sección transversal de una hoja.

  • Una célula COS-7 con expresión de EMTB-3xGFP (verde) y EB3-tdTomato (magenta) muestra el movimiento dinámico de los microtúbulos. Imagen en Lattice SIM 9 Phase Mode. Objetivo: Plan-Apochromat 63×/1,4 aceite
  • Se captó la dinámica de la actina en una célula COS-7 con expresión de LifeAct-tdTomato con 3D Leap Mode de SIM Apotome con el paso del tiempo. La imagen muestra una máxima proyección de intensidad de 30 planos en 3,4 µm de profundidad. Objetivo: Plan-Apochromat 40× / 1,4 aceite
  • Una célula COS-7 con expresión de EMTB-3xGFP (verde) y EB3-tdTomato (magenta) muestra el movimiento dinámico de los microtúbulos. Imagen en Lattice SIM 9 Phase Mode.
  • Se captó la dinámica de la actina en una célula COS-7 con expresión de LifeAct-tdTomato con 3D Leap Mode de SIM Apotome con el paso del tiempo.

Definir necesidades específicas en cuanto a velocidad y resolución

La necesidad de velocidades de captura mayores y de menores dosis lumínicas es casi ilimitada. La solidez de los patrones de iluminación estructurada de Elyra 7, además del software de reconstrucción de imágenes, permiten reducir significativamente el número de imágenes de fase necesarias tanto para los modos de adquisición Lattice SIM como para SIM Apotome, a la vez que se reduce la resolución solo ligeramente. La adquisición de Lattice SIM puede funcionar con imágenes de 9 fases por fotograma, mientras que para SIM Apotome basta con imágenes de 3 fases por fotograma, lo que aumenta la velocidad de captura un 44 % y un 66 %, respectivamente.

  • Cerebro de murino con expresión del marcador neuronal Thy1-eGFP, captado en el modo Lattice SIM en un rango de Z-stack de 75 µm.
  • Embrión de pez cebra con expresión de marcador vascular fli1-EGFP, captado en el modo SIM Apotome en un rango de Z-stack de 100 µm.
  • Cerebro de murino con expresión del marcador neuronal Thy1-eGFP, captado en el modo Lattice SIM en un rango de Z-stack de 75 µm.
    Cerebro de murino con expresión del marcador neuronal Thy1-eGFP, captado en el modo Lattice SIM en un rango de Z-stack de 75 µm.  Muestra cortesía de Herms Lab (MCN, Universidad de Múnich, Alemania)
    Muestra cortesía de Herms Lab (MCN, Universidad de Múnich, Alemania)

    Cerebro de murino con expresión del marcador neuronal Thy1-eGFP, captado en el modo Lattice SIM en un rango de Z-stack de 75 µm.

    Cerebro de murino con expresión del marcador neuronal Thy1-eGFP, captado en el modo Lattice SIM en un rango de Z-stack de 75 µm.

  • Embrión de pez cebra con expresión de marcador vascular fli1-EGFP, captado en el modo SIM Apotome en un rango de Z-stack de 100 µm.
    Embrión de pez cebra con expresión de marcador vascular fli1-EGFP, captado en el modo SIM Apotome en un rango de Z-stack de 100 µm. Muestra cortesía de Haass Lab (MCN, Universidad de Múnich, Alemania)
    Muestra cortesía de Haass Lab (MCN, Universidad de Múnich, Alemania)

    Embrión de pez cebra con expresión de marcador vascular fli1-EGFP, captado en el modo SIM Apotome en un rango de Z-stack de 100 µm.

    Embrión de pez cebra con expresión de marcador vascular fli1-EGFP, captado en el modo SIM Apotome en un rango de Z-stack de 100 µm.

Resolución de los detalles ocultos en las profundidades

A pesar de ser un microscopio basado en iluminación estructurada, Lattice SIM² y SIM² Apotome de Elyra 7 también le proporcionan una superresolución y un seccionamiento de alta calidad en muestras gruesas o con dispersión. La combinación de patrones de iluminación sólidos y una excelente tecnología de reconstrucción de imágenes nos permite captar imágenes de toda una sección de cerebro de murino de ~80 µm de grosor con expresión del marcador neuronal Thy1-eGFP.

  • Imagen en 3D de Lattice SIM² de una larva de C. elegans
  • Levadura viva con expresión de marcador de membrana acoplado a GFP y proteína asociada al aparato de Golgi acoplada a mCherry que se muestra como proyección de máxima intensidad. Muestra cortesía de C. MacDonald, G. Calder y P. O’Toole (Departamento de Biología y Tecnología de ciencias biológicas, Universidad de York, Reino Unido)
  • Imagen en 3D de SIM² Apotome de una hoja de una muestra viva de A. thaliana que muestra los microtúbulos (tubulina-GFP) en las tres capas de células superiores. Muestra y datos cortesía de Calder y P. O’Toole (Departamento de Biología y Tecnología de ciencias biológicas, Universidad de York, Reino Unido)
  • Se captaron imágenes en 3D de un embrión de pez cebra con expresión de marcador vascular fli1-EGFP. La figura muestra la máxima proyección de intensidad del conjunto de datos del Z-stack en mosaico. Objetivo: Plan-Neofluar 10× / 0,3. Muestra cortesía de Haass Lab (MCN, Universidad de Múnich, Alemania)
  • Imagen en 3D de Lattice SIM² de una larva de C. elegans. La imagen muestra una proyección de máxima intensidad. Muestra cortesía de Mango Lab (Universidad de Basilea, Suiza).
  • Imágenes de intervalo de Lattice SIM² de levadura viva con expresión de marcador de membrana acoplado a GFP y proteína asociada al aparato de Golgi acoplada a mCherry. Muestra cortesía de C. MacDonald, G. Calder y P. O’Toole (Departamento de Biología y Tecnología de ciencias biológicas, Universidad de York, Reino Unido).
  • Imagen en 3D de SIM² Apotome de una hoja de una muestra viva de A. thaliana que muestra los microtúbulos (tubulina-GFP) en las tres capas de células superiores. Muestra y datos cortesía de Calder y P. O’Toole (Departamento de Biología y Tecnología de ciencias biológicas, Universidad de York, Reino Unido).
  • SIM² Apotome: Se captaron imágenes en 3D de un embrión de pez cebra con expresión de marcador vascular fli1-EGFP. Máxima proyección de intensidad del conjunto de datos del Z-stack en mosaico. Muestra cortesía de Haass Lab (MCN, Universidad de Múnich, Alemania).

Descubrir la diversidad de la vida

Puede investigar muestras vivas o fijadas, grandes o pequeñas, finas o gruesas usando los modos Lattice SIM², SIM² Apotome o SMLM de Elyra 7. Tanto si estudia la dinámica vesicular en células o levaduras como si quiere desentrañar la arquitectura de plantas, C. elegans, el pez cebra, D. melanogaster o bacterias, con Elyra 7 disfrutará de una captura de imágenes accesible con superresolución para su organismo modelo favorito y para muchos otros especímenes.

  • Imágenes de SIM² Apotome y Lattice SIM² de un cerebro de murino con expresión del marcador neuronal Thy1-eGFP. Las imágenes muestran las proyecciones de máxima intensidad o codificadas por colores de los datos de volumen.
  • Imágenes de SIM² Apotome y Lattice SIM² de un cerebro de murino con expresión del marcador neuronal Thy1-eGFP. Las imágenes muestran las proyecciones de máxima intensidad o codificadas por colores de los datos de volumen.
  • Imágenes de SIM² Apotome y Lattice SIM² de un cerebro de murino con expresión del marcador neuronal Thy1-eGFP. Las imágenes muestran las proyecciones de máxima intensidad o codificadas por colores de los datos de volumen.
  • Imágenes de SIM² Apotome y Lattice SIM² de un cerebro de murino con expresión del marcador neuronal Thy1-eGFP. Las imágenes muestran las proyecciones de máxima intensidad o codificadas por colores de los datos de volumen.
    Imágenes de SIM² Apotome y Lattice SIM² de un cerebro de murino con expresión del marcador neuronal Thy1-eGFP. Las imágenes muestran las proyecciones de máxima intensidad o codificadas por colores de los datos de volumen. Muestra cortesía de Herms Lab (MCN, Universidad de Múnich, Alemania)
    Muestra cortesía de Herms Lab (MCN, Universidad de Múnich, Alemania)

    Imágenes de SIM² Apotome y Lattice SIM² de un cerebro de murino con expresión del marcador neuronal Thy1-eGFP. Las imágenes muestran las proyecciones de máxima intensidad o codificadas por colores de los datos de volumen.

    Objetivos: Plan-Neofluar 10× / 0,3, Plan-Apochromat 40× / 1,4 aceite y Plan-Apochromat 63× / 1,4 aceite.

    Imágenes de SIM² Apotome y Lattice SIM² de un cerebro de murino con expresión del marcador neuronal Thy1-eGFP. Las imágenes muestran las proyecciones de máxima intensidad o codificadas por colores de los datos de volumen.

  • Imágenes de SIM² Apotome y Lattice SIM² de un cerebro de murino con expresión del marcador neuronal Thy1-eGFP. Las imágenes muestran las proyecciones de máxima intensidad o codificadas por colores de los datos de volumen.
    Imágenes de SIM² Apotome y Lattice SIM² de un cerebro de murino con expresión del marcador neuronal Thy1-eGFP. Las imágenes muestran las proyecciones de máxima intensidad o codificadas por colores de los datos de volumen. Muestra cortesía de Herms Lab (MCN, Universidad de Múnich, Alemania)
    Muestra cortesía de Herms Lab (MCN, Universidad de Múnich, Alemania)

    Imágenes de SIM² Apotome y Lattice SIM² de un cerebro de murino con expresión del marcador neuronal Thy1-eGFP. Las imágenes muestran las proyecciones de máxima intensidad o codificadas por colores de los datos de volumen.

    Objetivos: Plan-Neofluar 10× / 0,3, Plan-Apochromat 40× / 1,4 aceite y Plan-Apochromat 63× / 1,4 aceite.

    Imágenes de SIM² Apotome y Lattice SIM² de un cerebro de murino con expresión del marcador neuronal Thy1-eGFP. Las imágenes muestran las proyecciones de máxima intensidad o codificadas por colores de los datos de volumen.

  • Imágenes de SIM² Apotome y Lattice SIM² de un cerebro de murino con expresión del marcador neuronal Thy1-eGFP. Las imágenes muestran las proyecciones de máxima intensidad o codificadas por colores de los datos de volumen.
    Imágenes de SIM² Apotome y Lattice SIM² de un cerebro de murino con expresión del marcador neuronal Thy1-eGFP. Las imágenes muestran las proyecciones de máxima intensidad o codificadas por colores de los datos de volumen. Muestra cortesía de Herms Lab (MCN, Universidad de Múnich, Alemania)
    Muestra cortesía de Herms Lab (MCN, Universidad de Múnich, Alemania)

    Imágenes de SIM² Apotome y Lattice SIM² de un cerebro de murino con expresión del marcador neuronal Thy1-eGFP. Las imágenes muestran las proyecciones de máxima intensidad o codificadas por colores de los datos de volumen.

    Objetivos: Plan-Neofluar 10× / 0,3, Plan-Apochromat 40× / 1,4 aceite y Plan-Apochromat 63× / 1,4 aceite.

    Imágenes de SIM² Apotome y Lattice SIM² de un cerebro de murino con expresión del marcador neuronal Thy1-eGFP. Las imágenes muestran las proyecciones de máxima intensidad o codificadas por colores de los datos de volumen.

Un viaje por las diferentes escalas

Las muestras biológicas a menudo contienen tipos de información completamente diferentes a distintas escalas de longitud. Poder recabar datos de baja a alta resolución en la misma muestra no solo aumenta su productividad, sino que también conecta los hallazgos entre sí y los pone en contexto para proporcionarle una visión completa.

  • SMLM: Simetría de orden ocho del complejo del poro nuclear en una célula A6.
  • SMLM: Se marcó la alfa-tubulina con Alexa 555 y la beta-tubulina con Alexa 488.
  • SMLM: Con Elyra 7, puede captar imágenes de una profundidad z de 1,4 µm en una sola captura.
  • SMLM: Simetría de orden ocho del complejo del poro nuclear en una célula A6.

    SMLM: Simetría de orden ocho del complejo del poro nuclear en una célula A6.

    SMLM: Simetría de orden ocho del complejo del poro nuclear en una célula A6.

    Gp210 se marcó con Alexa Fluor 647. Imagen de widefield (1.ª fila, izquierda), imagen de SMLM (1.ª fila, derecha) y zoom en la región (2.º fila, izquierda).

    SMLM: Simetría de orden ocho del complejo del poro nuclear en una célula A6.

  • SMLM: Se marcó la alfa-tubulina con Alexa 555 y la beta-tubulina con Alexa 488.

    SMLM: Se marcó la alfa-tubulina con Alexa 555 y la beta-tubulina con Alexa 488.

    SMLM: Se marcó la alfa-tubulina con Alexa 555 y la beta-tubulina con Alexa 488.

    Se captaron los dos canales de forma simultánea. Los epítopos se ocupan o bien con un fluoróforo verde o con uno rojo, mostrados mediante la exclusión mutua entre las moléculas del colorante verde y el rojo.

    SMLM: Se marcó la alfa-tubulina con Alexa 555 y la beta-tubulina con Alexa 488.

  • SMLM: Con Elyra 7, puede captar imágenes de una profundidad z de 1,4 µm en una sola captura.

    SMLM: Con Elyra 7, puede captar imágenes de una profundidad z de 1,4 µm en una sola captura.

    SMLM: Con Elyra 7, puede captar imágenes de una profundidad z de 1,4 µm en una sola captura.

    Imagen de SMM en 3D de Alexa 647 α-tubulina con codificación por colores para la profundidad.

    SMLM: Con Elyra 7, puede captar imágenes de una profundidad z de 1,4 µm en una sola captura.

Microscopía de localización de moléculas individuales (SMLM)

La SMLM abarca técnicas como PALM, dSTORM y PAINT. Gracias a sus láseres de gran potencia en todo el espectro visible y a la detección de cámara doble, Elyra 7 permite a los investigadores acceder a una amplia gama de colorantes, marcadores y fluoróforos en casi cualquier combinación posible.

  • Resuelva estructuras moleculares: la SMLM le permite mapear las ubicaciones precisas de las proteínas individuales.
  • Determine las relaciones entre las moléculas: detecte dos canales con precisión molecular.
  • Capte información en tres dimensiones: desentrañe las relaciones moleculares en z con confianza.

Descargas

    • ZEISS Elyra 7 with Lattice SIM²

      Your Live Imaging System with Unprecedented Resolution

      Páginas: 29
      Tamaño de archivo: 7 MB
    • ZEISS Lattice SIM Family

      Full Access to Super-Resolution Imaging for all Research Areas

      Páginas: 6
      Tamaño de archivo: 3 MB
    • Super-Resolution Imaging by Dual Iterative Structured Illumination Microscopy

      Páginas: 19
      Tamaño de archivo: 6 MB
    • ZEISS Elyra 7 and Idylle Everspark Buffer

      Streamlined experiments and reproducible results in localization microscopy

      Páginas: 4
      Tamaño de archivo: 1 MB
    • Introducing Lattice SIM for ZEISS Elyra 7

      Structured Illumination Microscopy with a 3D Lattice for Live Cell Imaging

      Páginas: 8
      Tamaño de archivo: 1 MB

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