
ZEISS LSM 900 con
Airyscan 2
Su dispositivo confocal compacto para la captura delicada de imágenes Multiplex y análisis inteligentes
Para dedicarse a sus cuestiones científicas, solo querrá tener datos de la mejor calidad. En microscopía, esto se traduce en el mejor contraste y la mejor resolución, a la vez que se mantiene una exposición mínima a la luz. LSM 900, su microscopio confocal compacto, se lo proporciona gracias a sus componentes optimizados para proporcionar los mejores resultados de captura de imágenes.


Captura de imágenes vivas con LSM Plus: Expresión ubicada en la membrana plasmática de Wnt3-EGFP en el desarrollo del techo óptico de un pez cebra de 4 días de edad.
Una experiencia confocal única con dimensiones reducidas
LSM 900 cuenta con soluciones para ofrecer la mejor calidad en la captura de imágenes confocales de células vivas, ya que cada componente se ha optimizado para ofrecer el máximo nivel de sensibilidad y contraste. LSM Plus le permite optimizar fácilmente los resultados de sus experimentos multicolor y con células vivas. Todas estas características de alta gama caben en un espacio muy reducido y son menos complejas para que pueda ahorrar un valioso espacio en el laboratorio y minimizar el tiempo necesario para formar a los usuarios.


Espermatogonia en testículo de Drosophila. Marcador multicolor con asterless (magenta), tubulina acetilada (cian) y Hoechst 33258 (amarillo). Imagen captada con ZEISS Airyscan 2 seguida de la tecnología Joint Deconvolution.
Obtenga mejores datos con mayor rapidez
Airyscan 2 le permite hacer más cosas que cualquier detector LSM convencional. Cada uno de sus 32 elementos detectores recaba información adicional, mientras que todos ellos en conjunto captan más luz, lo que da lugar a resultados cuantitativos con superresolución. Mediante la adición de información estructural con la tecnología Joint Deconvolution (jDCV), puede aumentar aún más la resolución. O use los modos Multiplex para recabar más información en menos tiempo.


ZEN Connect: Desde la adquisición de una imagen general hasta la definición de ROI y el cambio entre diferentes sistemas de captura de imágenes: Usted ahorra tiempo y siempre se mantiene al tanto de todo.
Aumente su productividad
El software ZEN de microscopía pone a su disposición multitud de asistentes para lograr resultados reproducibles en el menor tiempo posible. AI Sample Finder le ayuda a encontrar rápidamente regiones de interés, gracias a lo que tendrá más tiempo para los experimentos. Smart Setup le ayuda a aplicar los mejores ajustes para la captura de imágenes para sus marcadores fluorescentes. El procesamiento directo permite adquirir y procesar datos en paralelo. ZEN Connect le mantiene al corriente de todo, durante la captura de imágenes y después, cuando comparta el historial completo del experimento.
LSM Plus
Mejora de toda la experiencia confocal
LSM Plus mejora literalmente cualquier experimento confocal con facilidad, de forma independiente del modo de detección o del rango de emisión. Su deconvolución de filtro Wiener lineal prácticamente no precisa interacción y garantiza un resultado cuantitativo fiable. Al igual que en nuestro procesamiento con superresolución Airyscan de eficacia probada, la información subyacente de las propiedades ópticas se adapta de forma automática en función de la lente del objetivo, el índice de refracción y el rango de emisión.
Aplique LSM Plus sin ningún esfuerzo adicional y benefíciese de:
- Mejor relación señal-ruido con elevada velocidad de captura y baja potencia de láser, lo cual es especialmente útil para la captura de imágenes de células vivas con bajos niveles de expresión
- Mejor resolución de sus conjuntos de datos espectrales y multicolor
- Más información espacial y una mejora de la resolución aún mayor para muestras claras que permite cerrar el pinhole del LSM
- Flujos de trabajo integrados para combinar las ventajas de LSM Plus con la captura de imágenes de superresolución de Airyscan
Leyenda: Células RPE1 transfectadas con plásmido H2B-GFP. Proyección de máxima intensidad de 117 planos z. Comparación de sin (izquierda) y con LSM Plus (derecha).
Cortesía de Tingsheng, Mitosis Lab, Singapur

Esquema de la trayectoria del haz de ZEISS Airyscan

(1) Espejo, (2) Dicroico secundario variable, (3) Óptica de Airyscan, (4) Detector de Airyscan, (5) Disco de Airy
Airyscan 2
Una combinación única de captura de imágenes con superresolución y alta sensibilidad
Los microscopios confocales de barrido láser clásicos utilizan iluminación puntual para escanear la muestra de forma secuencial. Un pinhole limita espacialmente el disco Airy extendido para bloquear la luz desenfocada del detector. Al cerrar el pinhole se obtiene más resolución, pero a costa de detectar menos fotones.
Airyscan 2 es un detector de área con 32 elementos de detección dispuestos de forma circular. Cada uno de ellos actúa como un pequeño pinhole y contribuye así a la obtención de información de superresolución, mientras que toda la zona del detector capta más luz que el ajuste confocal estándar. Esto genera una eficiencia lumínica mucho mayor, a la vez que capta mejor información estructural.


Comparación de la imagen confocal (izquierda) con Airyscan SR (centro) y Airyscan Joint Deconvolution (derecha). Célula HeLa, con aumento de 4x y marcada con alfatubulina acetilada (verde).
Comparación de la imagen confocal (izquierda) con Airyscan SR (centro) y Airyscan Joint Deconvolution (derecha). Célula HeLa, con aumento de 4x y marcada con alfatubulina acetilada (verde).
Las 32 vistas aportan más información
Potente deconvolución con Airyscan jDCV
Cada uno de los 32 elementos detectores de Airyscan tiene una vista ligeramente diferente de la muestra, de modo que se proporciona información espacial adicional que hace posible la tecnología Joint Deconvolution. Esto reduce aún más la distancia que se puede resolver entre dos puntos, hasta 90 nm. Sus experimentos con superresolución se beneficiarán de una mejor separación de los marcadores múltiples o individuales.
Airyscan 2 con Multiplex
Campos de visión grandes y volúmenes de toda la muestra en un tiempo mínimo
Los modos Multiplex de Airyscan utilizan el conocimiento de la forma del punto del láser de excitación y la ubicación de los elementos detectores de área individuales para recoger más información espacial, incluso durante la lectura de píxeles paralela. Esto permite pasos más grandes al hacer un barrido con el láser de excitación sobre el campo de visión, lo cual mejora la velocidad de captura. La captación de más información espacial en el plano del pinhole permite una reconstrucción final de la imagen con mejor resolución que el muestreo de adquisición.
- Hasta cuatro líneas de imágenes en una sola pasada
- Mosaicos rápidos de zonas grandes
- Captura eficiente de imágenes de células vivas
- Rápida captura de imágenes volumétricas
Modos Multiplex de ZEISS LSM 900
LSM 900 |
Airyscan SR |
Multiplex SR-2Y |
Multiplex SR-4Y |
Multiplex CO-2Y |
Paralelización |
1 |
2 |
4 |
2 |
Resolución |
120/120 |
140/140 |
140/140 |
Confocal o mejor |
Máx. fps con el máx. campo de visión |
0.4 |
0.8 |
3.5 |
3.5 |
Marcado con anticuerpos, estructuras finas |
+++++ |
++++ |
++++ |
++ |
Marcado con anticuerpos, función de mosaico |
++ |
+++ |
+++++ |
+++ |
Captura de imágenes de células vivas |
++ |
+++ |
++++ |
+++++ |
División de células de LLC-PK1 (riñón de cerdo)
Para minimizar el fotoblanqueo y el daño en una muestra viva, resulta útil reducir el tiempo de adquisición y utilizar la mínima potencia de láser. LSM Plus ayuda a mejorar la relación señal-ruido, así como la resolución de estructuras como las fibras de los husos.
En este ejemplo se captaron 100 pilas Z con LSM 900 en Celldiscoverer 7 durante 29 minutos. Las imágenes muestran una proyección de máxima intensidad de 38 planos z. Células con expresión de H2B-mCherry (rojo) y α-tubulina-mEGFP (cian).
Embrión de pez cebra (2 días)
LSM Plus le ayuda a mejorar la relación señal-ruido cuando se capturan imágenes de grandes volúmenes que hay que renderizar en 3D. Visualización de la vasculatura (verde) y glóbulos rojos (magenta) mediante expresión de indicadores transgénicos, vista lateral, anterior a la izquierda.
Se captaron imágenes de una pila Z de 300 µm con 81 planos sobre tres mosaicos con la aplicación de LSM Plus. Los mosaicos se unieron y renderizaron en 3D con ZEN – powered by arvis®.
Muestra cortesía de B. Schmid, DZNE Múnich, Alemania


Estructuras mitocondriales en células Cos7
Estructuras mitocondriales en células Cos7
Estructuras mitocondriales en células Cos7
Las imágenes fueron captadas con LSM 900 en ZEISS Celldiscoverer 7 usando detectores confocales GaAsP (fila superior) y Airyscan 2 en el modo HS (fila inferior). Imágenes confocales con LSM Plus (arriba, derecha) con mejor relación señal-ruido y una mayor resolución de las estructuras mitocondriales. Airyscan Joint Deconvolution (abajo, derecha) resuelve la arquitectura de la membrana interna y externa aún mejor en comparación con Airyscan HS (abajo, izquierda). Con tinción para la proteína Tom20 de la membrana mitocondrial externa (verde, Alexa Fluor-488) y la proteína ATP5a de la membrana mitocondrial interna (magenta, Alexa Fluor-647).
Modo Multiplex


Embrión de Drosophila captado con modo Multiplex para LSM 900.
Embrión de Drosophila
Captado con modo Multiplex para LSM 900. Cortesía de J. Sellin, LIMES, Bonn, Alemania


La micrografía muestra un grano de polen de Lilium auratum, captado con Airyscan 2 en el modo Multiplex.
Grano de polen de Lilium auratum
Captado con Airyscan 2 en modo Multiplex. Cortesía de Jan Michels, Instituto zoológico, Universidad de Kiel
Embrión de pez cebra (Danio rerio)
Migración del primordio de la línea lateral y deposición de neuromastos inmaduros en un embrión de pez cebra (Danio rerio). Se anestesió a los animales y se les integró usando agarosa de baja concentración en una placa de Petri con base de cristal. La captura de imágenes inicial mediante cámaras permitió una navegación rápida y fácil de la muestra (arriba) en combinación con el contraste con gradiente de fase con adquisición de imágenes mediante fluorescencia. Después se llevó a cabo la captura de imágenes de alta resolución con Airyscan 2 en modo Multiplex en posiciones individuales identificadas en la imagen widefield (cuadros blancos). La adquisición de imágenes rápida y cuidadosa inherente del modo Multiplex de Airyscan 2 es muy beneficiosa para este tipo de aplicación. No se molesta al animal durante la captura de las imágenes, además de que se pueden tomar imágenes con una relación señal-ruido muy elevada y con un gran nivel de detalle al mismo tiempo.
Línea de células epiteliales de pulmón humano
Línea A549 de células epiteliales de pulmón humano teñidas con Mitotracker Orange (mitocondrias) y SIR-DNA (núcleos).
La adquisición de imágenes combina de forma fluida dos modos de captura de imágenes: los canales de fluorescencia donde se capturaron imágenes en modo confocal usando detectores de GaAsP de alta sensibilidad, mientras que el contraste con gradiente de fase se realiza mediante cámara.
Se obtuvo una captura a cámara rápida de 2,5 h usando un aumento de 40× con una apertura numérica de 0,95.
A veces necesita ver y evaluar sus imágenes multimodales durante la captura para planificar sus próximos pasos. ZEN le ofrece múltiples opciones. Puede sentarse frente a su ordenador conectado para iniciar la nueva función de procesamiento directo para procesar sus imágenes de Airyscan durante la captura.
Sin embargo, la captura de imágenes confocales solo es una parte de la imagen general y puede necesitar datos de modalidades de captura adicionales para complementar la vista de su muestra.
ZEN Connect puede aunar información de todos sus experimentos. Conserve el contexto de sus datos recabando todas las imágenes de una sesión del experimento en un solo proyecto, en el cual puede combinar la vista general e imágenes detalladas en alta resolución, todo ello perfectamente alineado. Una vez que haya creado un proyecto, siempre puede añadir y alinear contenido de cualquier otra fuente de captura de imágenes, ya sea de ZEISS o no, incluso bocetos y gráficos de análisis. Se mantendrá al tanto de todo en todo momento, durante los experimentos y meses o años después.
Sus proyectos de ZEN Connect conservan juntos todos los conjuntos de datos asociados. Nunca había sido tan fácil compartir resultados y colaborar con otras personas en equipo. El potente 3Dxl Viewer integrado, powered by arivis®, está optimizado para renderizar datos de imágenes grandes en 3D y 4D que haya obtenido con su nuevo y veloz LSM 900. Puede crear impresionantes renderizados y películas para reuniones y conferencias. Al fin y al cabo, una buena imagen vale más que mil palabras.
Aúne la información de todos sus experimentos

Cortesía de R. Hill, Universidad de Yale, New Haven, CT, EE. UU.
Sección de cerebro de ratón Thy1-YFP. Thy-1 (verde) está implicado en la comunicación de las células en el sistema nervioso. Imagen general (A) obtenida con ZEISS Axio Scan.Z1. El recuadro muestra imágenes de ROI agrandadas obtenidas en ZEISS LSM con Airyscan (B). La red neuronal se ve claramente. La profundidad de la pila Z se muestra codificada por colores. (C) muestra una sola neurona.