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Prodotto

ZEISS LSM 990 Spectral Multiplex

Imaging multi-fluorescenza per una comprensione approfondita della biologia spaziale

LSM 990 Spectral Multiplex eccelle nella separazione spettrale delle marcature fluorescenti. Ottimizzate i vostri esperimenti avanzati di multiplexing spettrale con numerosi marcatori proteici e una netta separazione dei segnali di fluorescenza, eliminando in modo affidabile l'autofluorescenza. Aumentate la produttività con un sistema che garantisce condizioni di imaging ottimali, l'identificazione immediata dei fluorofori e flussi di lavoro snelli dall'acquisizione all'analisi.

  • Informazioni spettrali da 380 a 900 nm acquisite in una singola scansione
  • Imaging spettrale personalizzato gestito con facilità
  • Segnali di fluorescenza separati in modo affidabile
  • Automazione del flusso di lavoro oltre il semplice imaging

Spectral Multiplexing efficiente

Acquisisci tutte le informazioni spettrali in una singola scansione d'immagine

LSM 990 Spectral Multiplex offre una produttività senza pari per i vostri esperimenti più esigenti di imaging spettrale, coprendo un intervallo di lunghezze d'onda da 380 a 900 nm. Il design intelligente del cammino ottico elimina ogni compromesso tra separazione spettrale, sensibilità, velocità, rapporto segnale-rumore e risoluzione. Con l'acquisizione diretta in modalità Lambda track, potete separare simultaneamente 10 o più marcatori individuali. L'acquisizione di tutti gli spettri in una singola scansione consente una separazione istantanea e la visualizzazione in tempo reale dei canali risultanti. Questo vi permette di identificare numerosi marcatori in tempi brevissimi, un grande vantaggio quando è richiesta una risoluzione spaziale potenziata o per l'imaging di grandi volumi e campioni vivi. I segnali indesiderati, come l'autofluorescenza, possono essere facilmente eliminati senza rimuovere inavvertitamente il segnale reale delle proteine bersaglio. Tutte le informazioni Lambda vengono preservate e gli spettri sono mostrati in grafici di facile lettura per aiutarvi a verificare se state visualizzando i marcatori fluorescenti attesi.

13 colori più autofluorescenza acquisiti simultaneamente

Left: Spectral image (Lambda stack) of 13 labels acquired simultaneously, real-color representation. Right: unmixed image of the 13 labels without autofluorescence, LSM Plus processing.
Left: Spectral image (Lambda stack) of 13 labels acquired simultaneously, real-color representation. Right: unmixed image of the 13 labels without autofluorescence, LSM Plus processing.

Sinistra: immagine spettrale (stack Lambda) di 13 marcatori acquisiti simultaneamente, rappresentazione a colori reali.
Destra: immagine con unmixing dei 13 marcatori senza autofluorescenza, elaborazione LSM Plus.

Campione per gentile concessione di Michal Skruzny, ZEISS Microscopy GmbH.

Unmixed single labels and autofluorescence
Unmixed single labels and autofluorescence

Marcatori singoli separati (unmixed) e autofluorescenza.

The 13 spectra and the autofluorescence spectrum were defined on samples labelled with 4 dyes to allow for spectral separation and clean spectra. 5 laser lines and excitation spectra (upper panel), emission spectra (lower panel).
The 13 spectra and the autofluorescence spectrum were defined on samples labelled with 4 dyes to allow for spectral separation and clean spectra. 5 laser lines and excitation spectra (upper panel), emission spectra (lower panel).

I 13 spettri e lo spettro dell'autofluorescenza sono stati definiti su campioni marcati con 4 coloranti per consentire la separazione spettrale e ottenere spettri puliti. 5 linee laser e spettri di eccitazione (pannello superiore), spettri di emissione (pannello inferiore).

Progettazione user-friendly

Personalizzate i vostri esperimenti spettrali con facilità.

Quando si avvia un esperimento multicolore, lo Smart Setup offre dati di eccitazione ed emissione per un'ampia gamma di fluorofori. Con un solo clic potete adattare l'intero sistema alle vostre esigenze, scegliendo tra opzioni di configurazione per una separazione spettrale ottimale, la massima velocità o un compromesso bilanciato. In alternativa, potete selezionare la modalità Lambda Scan per catturare tutti i segnali rilevanti dell'intervallo spettrale desiderato in una singola scansione, senza alcuna complicazione. Tutte le impostazioni sperimentali possono essere salvate e richiamate facilmente all'interno di ZEN, velocizzando l'utilizzo delle configurazioni personali. Integrate la funzione LSM Plus per garantire un rapporto segnale-rumore ottimale e una migliore risoluzione spaziale, senza rallentare il vostro esperimento.

Separazione immediata di GFP e RFP dall'autofluorescenza in Arabidopsis

Arabidopsis leaf expressing GFP-HDEL (labeling the endoplasmatic reticulum) and ST-mRFP (labeling Golgi bodies). Simultaneously acquired Lambda stack of 32 spectral channels clearly shows the spectral color range of each pixel.
Arabidopsis leaf expressing GFP-HDEL (labeling the endoplasmatic reticulum) and ST-mRFP (labeling Golgi bodies). Simultaneously acquired Lambda stack of 32 spectral channels clearly shows the spectral color range of each pixel.

Foglia di Arabidopsis che esprime GFP-HDEL (che marca il reticolo endoplasmatico) e ST-mRFP (che marca l'apparato del Golgi). Uno stack Lambda di 32 canali spettrali acquisito simultaneamente mostra chiaramente la gamma cromatica spettrale di ciascun pixel.

Campione per gentile concessione di Verena Kriechbaumer, Oxford Brookes University, Regno Unito.

Single channels of the Lambda stack from 411 to 740 nm
Single channels of the Lambda stack from 411 to 740 nm

Canali singoli dello stack Lambda da 411 a 740 nm.

Left: Spectra of GFP (green), mRFP (pink) and chlorophyll autofluorescence (white) as defined from Lambda stack allow to immediately distinguish different labels and autofluorescence in the image, even whilst imaging, and to unmix these. Right: Unmixed and LSM plus processed image (green: GFP / ER, pink: mRFP / Golgi bodies, white: chlorophyll).
Left: Spectra of GFP (green), mRFP (pink) and chlorophyll autofluorescence (white) as defined from Lambda stack allow to immediately distinguish different labels and autofluorescence in the image, even whilst imaging, and to unmix these. Right: Unmixed and LSM plus processed image (green: GFP / ER, pink: mRFP / Golgi bodies, white: chlorophyll).

Sinistra: Spettri di GFP (verde), mRFP (rosa) e clorofilla (bianco) estratti dallo stack Lambda: permettono di distinguere e separare i segnali e l'autofluorescenza, anche in tempo reale. Destra: Immagine dopo unmixing e LSM Plus (verde: ER, rosa: Golgi, bianco: clorofilla).

Unmixing spettrale in tempo reale

Separate i vostri marcatori fluorescenti in modo rapido e affidabile

Quando si esegue l'imaging di più canali o si utilizza la modalità Lambda, l'opzione di unmixing spettrale è sempre disponibile. Gli spettri salvati in precedenza possono essere richiamati da un database locale e, insieme a queste informazioni, vengono memorizzate e visualizzate tutte le impostazioni di imaging critiche. È possibile selezionare manualmente dall'immagine appena acquisita i pixel che contengono informazioni spettrali, oppure utilizzare la funzione integrata di Estrazione Automatica dei Componenti (Automatic Component Extraction) per identificarli. Queste fonti di informazione possono essere combinate in un processo di Linear Unmixing. Ogni immagine multicanale risultante può essere sottoposta a convalida e controllo qualità, con un canale "residuale" opzionale salvato insieme ai dati originali per una tracciabilità impeccabile dell'esperimento. Eseguite il Linear Unmixing al volo durante l'acquisizione delle informazioni spettrali in singole scansioni grazie all'Online Fingerprinting, ottenendo immediatamente i segnali separati – l'ideale per grandi volumi e per lo screening di combinazioni specifiche di marcatori fluorescenti.

Online Fingerprinting in tempo reale a 5 colori su cellule vive di rene epiteliale di maiale

Cellule LLC-PK1 (linea cellulare epiteliale di rene di maiale) che esprimono Tubulin-mEmerald (tubulina, ciano) e H2B-mCherry (DNA legato agli istoni, bianco), ulteriormente marcate con Mitotracker Orange (mitocondri, giallo), SiR-Actin (actina, rosa) e DOPE-ATTO 740 (vescicole, arancione). Imaging a 5 colori su cellule vive (time-lapse) acquisiti simultaneamente e separati in tempo reale tramite Online Fingerprinting, elaborati con LSM Plus.

Automazione del flusso di lavoro oltre l'imaging

Aumenta la produttività ottimizzando gli esperimenti multifasici

Combina tutti i metodi di acquisizione dei dati spettrali disponibili, inclusi Lambda Scan, Linear Unmixing e LSM Plus per l'ottimizzazione dell'SNR, in un'unica pipeline di elaborazione che esegue tutte le fasi degli esperimenti multidimensionali. I flussi di lavoro automatizzati per il multiplexing spettrale che comportano cicli multipli di colorazione e imaging possono essere semplificati con sistemi automatizzati di erogazione dei liquidi. I singoli cicli di colorazione, imaging, bleaching e stripping possono essere organizzati all'interno di ZEN.1 Trasferisci i dati risultanti a ZEISS arivis pro per l'allineamento 3D dei dati di multiplexing spettrale, la segmentazione degli oggetti tramite IA, o analisi statistiche come l'analisi del vicinato cellulare e la riduzione della dimensionalità.

Sezione di cervello di topo

Flusso di lavoro del multiplexing spettrale dalla rilevazione del campione all'elaborazione dei dati d'immagine

Cervello di topo fissato, sezioni spesse 40 µm. DAPI (nuclei), MAP2-A488 (dendriti e corpi neuronali), Parvalbumin-A568 (sottotipo di interneurone inibitorio/GABAergico), Iba1-A647 (microglia, le cellule immunitarie residenti nel cervello), VGAT-750 (terminali presinaptici degli interneuroni inibitori/GABAergici).

La panoramica è stata acquisita con ZEISS AI Sample Finder, dopodiché le panoramiche delle sezioni sono state integrate utilizzando un obiettivo 10x, una fotocamera Axiocam 705 e un'illuminazione a LED. Le scansioni dettagliate sono state acquisite con l'obiettivo Plan-Apochromat 63x/1.4 Oil. È stata impostata una scansione Lambda utilizzando i laser a 405, 488, 561, 639 e 730 nm, con 35 rilevatori a coprire lo spettro da 411 a 900 nm. Gli spettri dei 5 marcatori, insieme a uno spettro per l'autofluorescenza del tessuto ricavato da marcature singole, sono stati poi utilizzati per il processo di unmixing delle immagini. Le immagini sono state elaborate con LSM Plus.

Campione per gentile concessione di Luisa Cortes, Microscopy Imaging Center of Coimbra, CNC, Università di Coimbra, Portogallo.

Approfondimenti di Microscopia multispettrale

Analizza più proteine in parallelo: un sistema ottimizzato per l'efficienza della luce

Per un imaging delicato e ottimale con marcatori multipli, è fondamentale che tutti i componenti del sistema lavorino in perfetta armonia per massimizzare la trasmissione della luce di emissione. LSM 990 Spectral Multiplex presenta una configurazione dei rivelatori e un design del cammino ottico che consentono di preservare il prezioso segnale e andare oltre il convenzionale imaging multicolore.

  • Investigating more proteins in parallel

    ZEISS LSM 990 Spectral Multiplex

    4 MB


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