ZEISS Apotome 3
Producto

ZEISS Apotome 3​ Seccionamiento óptico en la captura de imágenes de fluorescencia para su microscopio de widefield​

Con la iluminación estructurada, eliminará de forma fácil y eficiente la luz desenfocada. ZEISS Apotome 3 calcula su sección óptica a partir de una serie de imágenes adquiridas con diferentes posiciones de cuadrícula. Obtenga imágenes de mucho contraste, incluso en muestras gruesas, con un sistema tan fácil de manejar como siempre.

  • Excelentes secciones ópticas​
  • Basado en algoritmos revisados por pares
  • Más información estructural 
  • Libre elección de fuente de luz y colorantes​
larva transgénica de pez cebra. Cortesía de H. Reuter, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Alemania.

Excelentes secciones ópticas​

Incluso de muestras gruesas

Apotome 3 aumenta significativamente la resolución axial en comparación con la microscopía de fluorescencia convencional: obtendrá secciones ópticas que permiten el renderizado en 3D, incluso de muestras gruesas. Tres cuadrículas de diferentes geometrías le proporcionan la mejor resolución para cada objetivo. Puede centrarse en su experimento, ya que se selecciona automáticamente la cuadrícula ideal, lo cual siempre da lugar a secciones ópticas con mucho contraste.

 

Leyenda: larva transgénica de pez cebra. Cortesía de H. Reuter, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Alemania.

neuronas corticales (izquierda: widefield; derecha: Apotome 3). Cortesía de L. Behrendt, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Alemania.
neuronas corticales (izquierda: widefield; derecha: Apotome 3). Cortesía de L. Behrendt, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Alemania.

Algoritmos revisados por pares

Enfoques lineales para auténticas secciones ópticas

Las soluciones basadas en software o bien requieren un conocimiento previo de la muestra (métodos basados en IA) o se basan en complejos algoritmos que no han sido revisados por pares. Los usuarios deben confiar en que estas soluciones de caja negra solo generen estructuras que sean reales. ZEISS Apotome 3 utiliza enfoques lineales y algoritmos bien documentados que le permiten calcular secciones ópticas auténticas y fiables.

Leyenda: neuronas corticales (izquierda: widefield; derecha: Apotome 3). Cortesía de L. Behrendt, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Alemania.

neuronas corticales. Imagen 1: widefield; imagen 2: Apotome 3; imagen 3: Apotome 3 + DCV

Neuronas corticales

neuronas corticales. Imagen 1: widefield; imagen 2: Apotome 3; imagen 3: Apotome 3 + DCV  Cortesía de L. Behrendt, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Alemania.
Cortesía de L. Behrendt, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Alemania.

Más información estructural

Compare el widefield, el seccionamiento óptico y la deconvolución

Mejore sus imágenes aún más mediante deconvolución usando un algoritmo patentado para la iluminación estructurada. El sistema retiene todos los datos sin procesar y le permite cambiar entre widefield, sección óptica e imágenes sometidas a deconvolución para ofrecer la máxima flexibilidad y la mejor capacidad de comparación. Los algoritmos de deconvolución robustos y fáciles de usar mejoran tanto la resolución lateral como la axial. El contraste mejorado y la supresión del ruido le permiten reconocer mejor las estructuras del objeto examinado.

Leyenda: neuronas corticales. Cortesía de L. Behrendt, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Alemania.

Libre elección de fuente de luz y colorantes

Libre elección de fuente de luz y colorantes

La decisión es suya, no de la tecnología

Sus experimentos a menudo evolucionan en cuanto a complejidad y requisitos. Por eso necesita un equipo adaptable. Use Apotome 3 con lámparas de haluro metálico, económicos LED de luz blanca o el suave sistema de iluminación multicolor Colibri. Independientemente de si trabaja con DAPI, Alexa488, Rhodamin, Cy5 o con colorantes vitales como GFP o mCherry, Apotome 3 se adapta a sus fluoróforos y a su fuente de luz, creando las imágenes nítidas y claras que busca.

Elija de forma sencilla los componentes

Personalice su microscopio combinando Apotome 3 con los accesorios necesarios para su investigación

  • Microscopio​

    Microscopio​

    • Serie Axio Observer (microscopio de investigación invertido)​​
    • Serie Axio Imager 2 (microscopio de investigación vertical)​​
    • Axio Zoom.V16 (microscopio de zoom)​​
    • Mejora sencilla de los sistemas existentes
  • Clases de objetivos recomendados​

    Clases de objetivos recomendados​

    • C-Apochromat​​
    • Plan-Apochromat​​
    • EC Plan-Neofluar
  • Iluminación: Colibri 7

    Iluminación

    • Colibri 5 y 7 (LED)​​
    • Xylis LED (LED de luz blanca)​​
    • HBO (lámpara de vapor de mercurio)​​
    • HXP 120 C (haluro metálico)
  • Cámaras: Axiocam 712 mono

    Cámaras

    • Modelos de cámara monocroma de bajo ruido ZEISS Axiocam​​
    • Cámaras seleccionadas de terceros

Descubra la tecnología que hay detrás​

La tecnología que hay detrás: El seccionamiento óptico con iluminación estructurada le permite minimizar de forma eficiente la luz desenfocada para crear imágenes nítidas y renderizados en 3D.
La tecnología que hay detrás. El seccionamiento óptico con iluminación estructurada le permite minimizar de forma eficiente la luz desenfocada para crear imágenes nítidas y renderizados en 3D.

Seccionamiento óptico cuantitativo

Auténticas secciones ópticas mediante iluminación estructurada

Para extraer la información de la imagen enfocada es preciso suprimir la luz procedente del exterior del plano focal. El seccionamiento óptico con iluminación estructurada le permite minimizar de forma eficiente la luz desenfocada para crear imágenes nítidas y renderizados en 3D.

A: Imagen de widefield. B – D: Imágenes brutas adquiridas con diferentes posiciones de cuadrícula. E: Imagen resultante; la luz desenfocada se elimina de forma eficiente mediante la iluminación estructurada.
A: Imagen de widefield. B – D: Imágenes brutas adquiridas con diferentes posiciones de cuadrícula. E: Imagen resultante; la luz desenfocada se elimina de forma eficiente mediante la iluminación estructurada.

A: Imagen de widefield. B – D: Imágenes brutas adquiridas con diferentes posiciones de cuadrícula. E: Imagen resultante; la luz desenfocada se elimina de forma eficiente mediante la iluminación estructurada.

A: Imagen de widefield. B – D: Imágenes brutas adquiridas con diferentes posiciones de cuadrícula. E: Imagen resultante; la luz desenfocada se elimina de forma eficiente mediante la iluminación estructurada.

El principio operativo de Apotome 3

Apotome 3 utiliza una cuadrícula para generar un patrón de diferencias de intensidad. Si hay presente luz desenfocada en una determinada región de la muestra, la cuadrícula se vuelve invisible. Tras la adquisición de la fluorescencia de una posición de cuadrícula, la cuadrícula se mueve a la siguiente posición. Se calcula una sección óptica auténtica con mayor contraste y resolución.

C. elegans, soporte entero, verde: GFP, azul: DAPI. Objetivo: Plan-Apochromat 20×/0,8.
C. elegans, soporte entero, verde: GFP, azul: DAPI. Objetivo: Plan-Apochromat 20×/0,8. Cortesía del Prof. Schnabel, T.U. Braunschweig, Alemania.
Cortesía del Prof. Schnabel, T.U. Braunschweig, Alemania.

C. elegans, soporte entero, verde: GFP, azul: DAPI. Objetivo: Plan-Apochromat 20×/0,8.

C. elegans, soporte entero, verde: GFP, azul: DAPI. Objetivo: Plan-Apochromat 20×/0,8. Cortesía del Prof. Schnabel, T.U. Braunschweig (Alemania).

Volúmenes de sección óptimos para su muestra​

Independientemente del aumento usado, Apotome 3 coloca automáticamente la cuadrícula óptima en la trayectoria del haz. ​

A: se detecta la emisión de luz desde las áreas desenfocadas. Se reduce el contraste y la resolución. B: la reducción de la fluorescencia de fondo no deseada aumenta con la frecuencia de la cuadrícula. La sección óptica se vuelve más fina. C: se suprime la información de la imagen procedente del exterior del plano focal. Esto mejora el contraste y la resolución de la sección óptica. D: en este ejemplo, "low grid" proporciona el grosor óptimo de la sección. Las imágenes de este tipo son especialmente aptas para análisis en 3D y para el procesamiento con software de renderizado.

Renderizado 3D de neuronas corticales teñidas para ADN y microtúbulos. Cortesía de L. Behrendt, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Alemania.

ZEISS Apotome 3 en funcionamiento​

Ejemplos de aplicación

  

ZEISS Apotome 3 en funcionamiento
Fluorescencia convencional - Neuronas de Drosophila, azul: DAPI, amarillo: GFP. Objetivo: Plan-Apochromat 20×/0,8. Cortesía de M. Koch, Genética molecular y del desarrollo, Universidad de Leuven, Bélgica.​
Apotome 3 - Neuronas de Drosophila, azul: DAPI, amarillo: GFP. Objetivo: Plan-Apochromat 20×/0,8. Cortesía de M. Koch, Genética molecular y del desarrollo, Universidad de Leuven, Bélgica.​
Fluorescencia convencional | Apotome 3​

Neuronas de Drosophila​

Neuronas de Drosophila, azul: DAPI, amarillo: GFP. Objetivo: Plan-Apochromat 20×/0,8. Cortesía de M. Koch, Genética molecular y del desarrollo, Universidad de Leuven, Bélgica.

Embrión de Drosophila

Embrión de Drosophila, verde: HRP, rojo: marcador glial, pila Z 100 µm. Cortesía de C. Klämbt, Instituto de Neurobiología, Universidad de Münster, Alemania.

Comparación de imagen de widefield y renderizado 3D de neuronas corticales teñidas para ADN y microtúbulos. Cortesía de L. Behrendt, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Alemania.
Comparación de imagen de widefield y renderizado 3D de neuronas corticales teñidas para ADN y microtúbulos. Cortesía de L. Behrendt, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Alemania.
Widefield | Apotome 3

Neuronas corticales

Comparación de imagen de widefield y renderizado 3D de neuronas corticales teñidas para ADN y microtúbulos. Cortesía de L. Behrendt, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Alemania.

De izquierda a derecha: Widefield, Apotome 3, Apotome 3 + Deconvolución​

Raíz de Lotus japonicus

De izquierda a derecha: Widefield, Apotome 3, Apotome 3 + Deconvolución​

De izquierda a derecha: Widefield, Apotome 3, Apotome 3 + Deconvolución​

De izquierda a derecha: Widefield, Apotome 3, Apotome 3 + Deconvolución​

Raíz de Lotus japonicus

Autofluorescencia de una raíz de Lotus japonicus infectada con bacterias simbióticas teñidas con mcherry. Cortesía de F. A. Ditengou, Universidad de Friburgo, Alemania.

De arriba a abajo: Widefield, Apotome 3, Apotome 3 + Deconvolución

Larvas transgénicas de pez cebra​

De arriba a abajo: Widefield, Apotome 3, Apotome 3 + Deconvolución

De arriba a abajo: Widefield, Apotome 3, Apotome 3 + Deconvolución

De arriba a abajo: Widefield, Apotome 3, Apotome 3 + Deconvolución

Larvas transgénicas de pez cebra​

Larvas transgénicas de pez cebra a los 4 días tras la fertilización teñidas para: Proteína ácida fibrilar glial, tubulina acetilada, GFP y ADN. Añadidas en agarosa al 1,2 % de bajo punto de fusión. Cortesía de H. Reuter, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Alemania.

Aplicaciones típicas

Tarea
Función de ZEISS Apotome 3
Cultivos celulares
Captura de imágenes 2D
✓ Imágenes individuales 2D
Captura rápida de una imagen 2D
✓ Sección óptica disponible en línea en el monitor
Detección fiable del marcador incluso con fuerte fluorescencia de fondo
✓ Selección automática de la cuadrícula para lograr el contraste óptimo con cada objetivo
Combinación de múltiples técnicas de contraste
✓ Cualquier combinación de canales de fluorescencia, campo claro, DIC y contraste de fases
✓ Configuración individual de cada canal de fluorescencia como sección óptica o imagen de widefield
Captura de imágenes de células vivas
Menor fototoxicidad
✓ Fototoxicidad especialmente baja en combinación con iluminación LED y cámaras muy sensibles como ZEISS Axiocams
Imágenes de cámara rápida
✓ En función del tiempo de exposición, hasta tres imágenes por segundo
✓ Duplicación de la frecuencia de fotogramas con el modo "Burst Mode"
Secciones de vibratomo, muestras histológicas
Captura de imágenes en 3D
✓ Selección automática de la cuadrícula óptima para cada objetivo
Modificación del grosor de la sección óptica
✓ Cuadrícula libremente seleccionable en función de la muestra
Profundidad de penetración
✓ En función de la densidad óptica del tejido
Reconstrucción 3D
✓ Renderizado de la pila de imágenes mediante función de software integrada
✓ Transferencia automática de los parámetros de los canales de fluorescencia individuales
Análisis cuantitativo
✓ Mediciones de tamaño reproducible mediante calibración automática del sistema
Soportes completos
Captura de imágenes en 3D
✓ Multicanal, pila z y cámara rápida, deconvolución, imágenes en modo de datos sin procesar, renderizado 3D
Captura de imágenes grandes
✓ Adquisición automática de secciones grandes usando cuadros y posiciones

Descargas

    • 3D Imaging Systems

      Your Guide to the Widest Selection of Optical Sectioning, Electron Microscopy and X-ray Microscopy Techniques.

      Páginas: 68
      Tamaño de archivo: 5 MB
    • ZEISS Apotome 3

      Optical sectioning in fluorescence imaging for your widefield microscope

      Páginas: 21
      Tamaño de archivo: 3 MB
    • ZEISS Apotome 3 - Flyer

      Hardware-based, Quantitative Optical Sectioning with Well Documented Algorithms

      Páginas: 6
      Tamaño de archivo: 1 MB

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