ZEISS Apotome 3
Produit

ZEISS Apotome 3 Sectionnement optique en imagerie de fluorescence pour votre microscope à champ large

L'éclairage structuré élimine simplement et efficacement la lumière hors foyer. ZEISS Apotome 3 calcule votre sectionnement optique à partir d'un nombre d'images capturées avec des positions de grille différentes. Obtenez des images fortement contrastées, même à partir d'échantillons plus épais, tandis que votre système conserve sa facilité d'utilisation habituelle.

  • Coupes optiques exceptionnelles
  • Algorithmes évalués par des pairs
  • Informations supplémentaires sur la structure 
  • Sources de lumière et colorants au choix
Larve de poisson zèbre transgénique. Avec l'aimable autorisation de H. Reuter, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Allemagne.

Coupes optiques exceptionnelles

Même à partir d'échantillons épais

Apotome 3 accroît significativement la résolution axiale par rapport à la microscopie à fluorescence conventionnelle : vous obtenez des sections optiques exceptionnelles qui permettent un rendu 3D, même à partir d'échantillons épais. Trois grilles de géométrie différente permettent d'obtenir une résolution optimisée avec chaque objectif. La grille adéquate est sélectionnée automatiquement pour obtenir sans faille des sections optiques à haut contraste et pour que vous puissiez vous concentrer sur votre expérience.

 

Légende : Larve de poisson zèbre transgénique. Avec l'aimable autorisation de H. Reuter, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Allemagne.

Neurones corticaux (à gauche : champ large ; à droite : Apotome 3). Avec l'aimable autorisation de L. Behrendt, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Allemagne.
Neurones corticaux (à gauche : champ large ; à droite : Apotome 3). Avec l'aimable autorisation de L. Behrendt, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Allemagne.

Algorithmes évalués par des pairs

Approches linéaires pour des sections optiques réelles

Les solutions logicielles exigent soit une connaissance préalable de l'échantillon (méthodes basées sur l'IA), soit reposent sur des algorithmes complexes non revus par des pairs. Les utilisateurs doivent ensuite croire que ces solutions de type boîte noire ne produisent que des structures réelles. ZEISS Apotome 3 utilise une approche linéaire et des algorithmes documentés pour calculer des sections optiques fiables et réelles.

Légende : Neurones corticaux (à gauche : champ large ; à droite : Apotome 3). Avec l'aimable autorisation de L. Behrendt, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Allemagne.

Neurones corticaux. Image 1 - champ large, image 2 - Apotome 3, image 3 - Apotome 3 + DCV

Neurones corticaux

Neurones corticaux. Image 1 - champ large, image 2 - Apotome 3, image 3 - Apotome 3 + DCV  Avec l'aimable autorisation de L. Behrendt, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Allemagne.
Avec l'aimable autorisation de L. Behrendt, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Allemagne.

Des informations supplémentaires sur la structure

Comparez le champ large, le sectionnement optique et la déconvolution

Un algorithme pour éclairage structuré améliore encore les images que vous créez par déconvolution. En conservant l'ensemble des données brutes, le système permet de basculer entre les images à champ large, à sectionnement optique et déconvoluées pour une flexibilité et une comparabilité maximales. Les algorithmes de déconvolution puissants allient fiabilité et simplicité d'utilisation pour une meilleure résolution latérale et axiale de vos images. L'amélioration du contraste et la suppression du bruit vous permettent de mieux identifier la structure des objets examinés.

Légende : Neurones corticaux. Avec l'aimable autorisation de L. Behrendt, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Allemagne.

Sources de lumière et colorants au choix

Sources de lumière et colorants au choix

Vous décidez, pas la technologie

La complexité et les exigences de vos expériences évoluent au fil de votre progression. Vous avez donc besoin d'un équipement qui s'adapte à vos contraintes. Apotome 3 s'utilise avec des lampes aux halogénures métalliques, des LED économiques à lumière blanche ou le système d'éclairage doux et multicolore Colibri. Que vous travailliez avec DAPI, Alexa488, Rhodamin, Cy5 ou avec des colorants vitaux de type GFP ou mCherry, Apotome 3 s'adapte à vos fluorophores et à votre source de lumière, créant des images nettes et lumineuses à la hauteur de vos attentes.

La souplesse dans le choix des composants

Assemblez votre microscope sur mesure en combinant Apotome 3 avec les accessoires nécessaires à vos recherches

  • Microscope

    Microscope

    • Gamme Axio Observer (microscope inversé pour la recherche)
    • Gamme Axio Imager 2 (microscope droit pour la recherche)
    • Axio Zoom.V16 (microscope à zoom)
    • Mise à niveau simple de systèmes existants
  • Catégories d'objectifs recommandés

    Catégories d'objectifs recommandés

    • C-Apochromat
    • Plan-Apochromat
    • EC Plan-Neofluar
  • Éclairage : Colibri 7

    Éclairage

    • Colibri 5 et 7 (LED)
    • Xylis LED (LED à lumière blanche)
    • HBO (lampe à vapeur de mercure)
    • HXP 120 C (lampe aux halogénures métalliques)
  • Caméras : Axiocam 712 mono

    Caméras

    • Modèles de caméras monochromes ZEISS Axiocam à faible bruit
    • Certains modèles de caméras de fabricants tiers

Découvrez la technologie qui se cache derrière cet instrument

La technologie derrière l'instrument : Le sectionnement optique utilisant l'éclairage structuré permet de minimiser efficacement la lumière diffusée hors champ pour créer des images nettes et des rendus en 3D.
La technologie derrière l'instrument. Le sectionnement optique utilisant l'éclairage structuré permet de minimiser efficacement la lumière diffusée hors champ pour créer des images nettes et des rendus en 3D.

Light from outside the focal plane needs to be suppressed to extract the in-focus image information. Optical sectioning using structured illumination allows you to efficiently minimize out-of-focus light to create crisp images and 3D renderings.

Sectionnement optique quantitatif

Sectionnement optique réel utilisant l'éclairage structuré

La lumière provenant de l'extérieur du plan focal doit être supprimée pour extraire les informations de l'image focale. Le sectionnement optique utilisant l'éclairage structuré permet de minimiser efficacement la lumière diffusée hors champ pour créer des images nettes et des rendus en 3D.

A : Image à champ large. B – D : Images brutes capturées avec différentes positions de grille. E : Image du résultat ; la lumière diffusée hors champ est éliminée efficacement par l'éclairage structuré.
A : Image à champ large. B – D : Images brutes capturées avec différentes positions de grille. E : Image du résultat ; la lumière diffusée hors champ est éliminée efficacement par l'éclairage structuré.

A : Image à champ large. B – D : Images brutes capturées avec différentes positions de grille. E : Image du résultat ; la lumière diffusée hors champ est éliminée efficacement par l'éclairage structuré.

A : Image à champ large. B – D : Images brutes capturées avec différentes positions de grille. E : Image du résultat ; la lumière diffusée hors champ est éliminée efficacement par l'éclairage structuré.

Le principe de fonctionnement d'Apotome 3

Apotome 3 utilise une grille pour générer un modèle des variations d'intensité. Si une lumière hors champ apparaît sur une zone de l'échantillon, la grille devient invisible. Une fois la fluorescence acquise pour une position de grille, la grille passe à la position suivante. Une section optique réelle avec un contraste et une résolution supérieurs est calculée.

C. elegans, montage complet, vert : GFP, bleu : DAPI. Objectif : Plan-Apochromat 20 ×/0,8.
C. elegans, montage complet, vert : GFP, bleu : DAPI. Objectif : Plan-Apochromat 20 ×/0.8. Avec l'aimable autorisation du professeur Schnabel, T.U. Braunschweig, Allemagne.
Avec l'aimable autorisation du professeur Schnabel, T.U. Braunschweig, Allemagne.

C. elegans, montage complet, vert : GFP, bleu : DAPI. Objectif : Plan-Apochromat 20 ×/0.8.

C. elegans, montage complet, vert : GFP, bleu : DAPI. Objectif : Plan-Apochromat 20 ×/0,8. Avec l'aimable autorisation du professeur Schnabel, T.U. Braunschweig, Allemagne.

Un volume de section optimal pour votre échantillon

Quel que soit le grossissement utilisé, Apotome 3 place automatiquement la grille optimale sur la trajectoire du faisceau.

A : Une lumière diffusée hors champ est détectée. Le contraste et la résolution sont réduits. B : La réduction de la fluorescence d'arrière-plan indésirable est proportionnelle à l'augmentation de la fréquence de la grille. La section optique s'amincit. C : Les informations sur l'image provenant de l'extérieur du plan focal sont supprimées pour améliorer le contraste et la résolution de la section optique. D : L'image « low grid » indique l'épaisseur de section optimale pour cet exemple. Ces images sont particulièrement adaptées aux analyses en 3D et au traitement avec un logiciel de rendu.

Rendu 3D de neurones corticaux colorés pour l'ADN et les microtubules. Avec l'aimable autorisation de L. Behrendt, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Allemagne.

ZEISS Apotome 3 en action

Exemples d'application

  

ZEISS Apotome 3 en action
Fluorescence conventionnelle - Neurones de drosophile, bleu : DAPI, jaune : GFP. Objectif : Plan-Apochromat 20×/0.8. Avec l'aimable autorisation de M. Koch, génétique moléculaire et du développement, Université de Louvain, Belgique.
Apotome 3 – Neurones de drosophile, bleu : DAPI, jaune : GFP. Objectif : Plan-Apochromat 20×/0.8. Avec l'aimable autorisation de M. Koch, génétique moléculaire et du développement, Université de Louvain, Belgique.
Fluorescence conventionnelle | Apotome 3

Neurones de drosophile

Neurones de drosophile, bleu : DAPI, jaune : GFP. Objectif : Plan-Apochromat 20×/0.8. Avec l'aimable autorisation de M. Koch, génétique moléculaire et du développement, Université de Louvain, Belgique.

Embryon de drosophile

Embryon de drosophile, vert : HRP, rouge : marqueur glia, pile Z de 100 µm. Avec l'aimable autorisation de C. Klämbt, Institut de neurobiologie, Université de Münster, Allemagne.

Comparaison d'une image en champ large et d'un rendu 3D de neurones corticaux colorés pour l'ADN et les microtubules. Avec l'aimable autorisation de L. Behrendt, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Allemagne.
Comparaison d'une image en champ large et d'un rendu 3D de neurones corticaux colorés pour l'ADN et les microtubules. Avec l'aimable autorisation de L. Behrendt, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Allemagne.
Champ large | Apotome 3

Neurones corticaux

Comparaison d'une image en champ large et d'un rendu 3D de neurones corticaux colorés pour l'ADN et les microtubules. Avec l'aimable autorisation de L. Behrendt, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Allemagne.

De gauche à droite : Champ large, Apotome 3, Apotome 3 + déconvolution

Racine de Lotus Japonicus

De gauche à droite : Champ large, Apotome 3, Apotome 3 + déconvolution

De gauche à droite : Champ large, Apotome 3, Apotome 3 + déconvolution

De gauche à droite : Champ large, Apotome 3, Apotome 3 + déconvolution

Racine de Lotus Japonicus

Autofluorescence d'une racine de Lotus Japonicus infectée par des bactéries symbiotiques colorées au mCherry. Avec l'aimable autorisation de F. A. Ditengou, Université de Fribourg, Allemagne.

De haut en bas : Champ large, Apotome 3, Apotome 3 + déconvolution

Larves de poisson zèbre transgénique

De haut en bas : Champ large, Apotome 3, Apotome 3 + déconvolution

De haut en bas : Champ large, Apotome 3, Apotome 3 + déconvolution

De haut en bas : Champ large, Apotome 3, Apotome 3 + déconvolution

Larves de poisson zèbre transgénique

Larves de poisson zèbre transgéniques à 4 jours après la coloration de la fécondation pour : protéine acide fibrillaire gliale, tubuline acétylée, GFP et ADN. Incorporées dans 1,2 % d'agarose à faible point de fusion. Avec l'aimable autorisation de H. Reuter, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Allemagne.

Applications typiques

Tâche
Fonction de ZEISS Apotome 3
Culture cellulaire
Imagerie en 2D
✓ Images individuelles en 2D
Imagerie rapide d'une image en 2D
✓ Sectionnement optique disponible uniquement sur le moniteur
Détection fiable du marqueur même avec une forte fluorescence d'arrière-plan
✓ Sélection automatique de la grille pour un contraste optimal avec chaque objectif
Combinaison de plusieurs techniques de contraste
✓ Toute combinaison de canaux de fluorescence, champ clair, DIC et contraste de phase
✓ Configuration individuelle de chaque canal de fluorescence sous forme de section optique ou d'image en champ large
Imagerie des cellules vivantes
Réduction de la phototoxicité
✓ Phototoxicité particulièrement faible en association avec un éclairage LED et des caméras haute sensibilité telles que ZEISS Axiocam
Images en time-lapse
✓ Selon le temps d'exposition, jusqu'à trois images par seconde
✓ Doublement de la fréquence d'image avec le mode « Burst Mode »
Sectionnements au vibratome, échantillons histologiques
Imagerie 3D
✓ Sélection automatique de la grille optimale pour chaque objectif
Modification de l'épaisseur de section optique
✓ Sélection libre de la grille en fonction de l'échantillon
Profondeur de pénétration
✓ En fonction de la densité optique des tissus
Reconstruction 3D
✓ Rendu de la pile d'images à l'aide d'une fonction logicielle intégrée
✓ Transfert automatique des paramètres des différents canaux de fluorescence
Analyse quantitative
✓ Reproductibilité des mesures de dimensions grâce à l'étalonnage automatique du système
Montages complets
Imagerie 3D
✓ Multicanal, pile Z et time-lapse, déconvolution, images en mode de données brutes, rendu 3D
Imagerie grand champ
✓ Acquisition automatique de grandes sections à l'aide de Tiles & Positions

Téléchargements

    • 3D Imaging Systems

      Your Guide to the Widest Selection of Optical Sectioning, Electron Microscopy and X-ray Microscopy Techniques.

      Pages: 68
      Taille du fichier: 5 MB
    • ZEISS Apotome 3

      Optical sectioning in fluorescence imaging for your widefield microscope

      Pages: 21
      Taille du fichier: 3 MB
    • ZEISS Apotome 3 - Flyer

      Hardware-based, Quantitative Optical Sectioning with Well Documented Algorithms

      Pages: 6
      Taille du fichier: 1 MB

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