Témoignage Utilisateur

Comment solutionner le traitement des Big Data en industrie pharmaceutique ?

Zoom sur une solution durable expérimentée par le laboratoire Charles River
11 novembre 2024 · 15 MIN LECTURE
  • Logiciel
  • Sciences de la Vie
Interviewée dans cet article Marta da Silva PhD, neurobiologiste et scientifique principale

Résumé

Dans un contexte où la recherche pharmaceutique se tourne de plus en plus vers des modèles in vitro complexes pour mieux évaluer l’efficacité et la sécurité des médicaments, l’analyse d’image à haut contenu (HCA) s’impose comme une technologie clé. Cette méthode pose néanmoins la question du traitement des big data générées. 

Grâce à des logiciels de pointe combinant visualisation 4D et intelligence artificielle, les chercheurs peuvent désormais explorer avec facilité et précision les interactions cellulaires au sein de modèles biologiques avancés, tels que les organoïdes. Cette approche ouvre la voie à une compréhension plus fine des mécanismes pathologiques et à une évaluation plus rigoureuse des médicaments, tout en contribuant à réduire l’usage des modèles animaux.

Récemment, le laboratoire Charles River a déployé l'outil d'analyse d'images ZEISS Arivis, spécialement pour le développement d'essais in vitro et le criblage à haut débit pour les différentes phases du pipeline de découverte de médicaments.​ L'article « Raising the Bar with High Content Analysis » publié sur le blog Eureka présente la manière dont Charles River a solutionné ses problématiques de traitement big data, grâce à l'intégration de l'intelligence artificielle. Marta da Silva, docteur en neurobiologie et scientifique senior, a donné son retour d'expérience sur le fonctionnement de ce nouvel outil d'analyse.

Découvrez :

  • L'apport de ce type de logiciel d'analyse d'images
  • L'application concrète dans la recherche pharmaceutique 
  • Un exemple d'utilisation sur des organoïdes intestinaux dérivés d’iPSC utilisés pour évaluer la toxicité des composés

Une technologie de pointe pour des analyses complexes

Le logiciel ZEISS arivis se distingue par sa capacité à analyser et visualiser des données biologiques complexes générées par des techniques de biologie à haut contenu. Il permet d’évaluer et de quantifier les changements dans des processus biologiques complexes (tels que la morphologie cellulaire, les expressions protéiques, la localisation des protéines et les interactions cellulaires) au fil du temps ou lors du traitement avec des modalités. Cependant, il se différencie des autres logiciels d’imagerie à haut contenu par sa capacité à analyser et visualiser en quatre dimensions, ce qui permet une analyse dynamique complexe au fil du temps.

Arivis est l’un des outils les plus avancés pour analyser des données complexes générées par des techniques de biologie à haut contenu. Il se distingue des autres logiciels d’imagerie en raison de plusieurs caractéristiques clés : il permet l’analyse et la visualisation en quatre dimensions, ce qui assure une analyse dynamique complexe au fil du temps.

Marta da Silva, PhD Neurobiologiste et scientifique principale

Répondre aux besoins des modèles in vitro avancés

Plus que jamais, les industries ont besoin de tester leurs composés médicamenteux dans des modèles in vitro plus pertinents et plus complexes sur le plan physiologique. Ces modèles imitent les structures et les fonctions type du tissu humain plus efficacement que les cultures monocouches. Cependant l’utilisation de ces modèles in vitro complexes (y compris les modèles de co-culture, les modèles 3D, le traçage cellulaire dans le temps et les thérapies cellulaires) nécessite une amélioration des méthodes de capture et d'analyse de données. La complexité des lectures d’analyse d’images n’est plus gérable à l’aide d’un logiciel d’analyse d’images standard. La création de flux de travail complexes (algorithmes ou pipelines) pour analyser les données est nécessaire. Des logiciels comme Arivis le permettent.

Évaluation de la charge virale dans les organoïdes intestinaux dérivés du hIPSC (HIO)
Images de l’équipe de Charles River à Leiden

Application de ces outils d'analyse pour le développement de médicaments

L'utilisation d'Arivis a permis au laboratoire d'analyser des organoïdes intestinaux dérivés d’iPSC, des modèles in vitro miniaturisés développés pour évaluer l’efficacité et la toxicité antivirales des composés. Par exemple, lors de l'évaluation des composés antiviraux connus qui manquaient d’efficacité dans les essais cliniques, l'analyse traditionnelle a pourtant montré que ces composés passaient les tests de cytotoxicité et que les gènes viraux diminuaient considérablement. Avec seulement ces lectures simples, les composés seraient passés à la phase suivante de l’évaluation des médicaments. Cependant, la réévaluation des charges virales par immunocytochimie et avec Arivis comme logiciel de segmentation a permis de montrer que le composé n’était pas efficace pour éliminer le virus, évitant ainsi une progression prématurée dans le développement du médicament. 

Graphique 2. Évaluation de la charge virale dans les organoïdes intestinaux dérivés du hIPSC (HIO). Les organoïdes infectés par le virus EV-A71 ont été marqués avec le marqueur nucléaire DAPI (en bleu), le marqueur d’actine F Phalloïdine (en orange) et le marqueur d’ARNdb (en vert). Les images ont été acquises avec un imageur à haut contenu et Arivis a été utilisé pour coder en couleur segmenté chaque organoïde (image centrale). Une analyse quantitative des niveaux d’infection par EV-A71, déterminée par le nombre de dsRNA puctae par organoïde, a été obtenue (graphique de gauche).

Myélinisation-Neurite/enveloppement axonal dans la co-culture de neurones ioGlutamatergic et d’ioOligodendrocytes.
Images de l’équipe de Charles River à Leiden

Un autre exemple montre comment ce nouvel outil d’analyse améliore les capacités non seulement des modèles tridimensionnels, mais aussi des modèles de co-culture bidimensionnels plus complexes. Les caractéristiques de la pathogenèse des maladies neurodégénératives courantes telles que la sclérose en plaques (SEP) et la maladie d’Alzheimer (MA) sont le dysfonctionnement des oligodendrocytes et la perturbation de la myélinisation des axones. Les oligodendrocytes, les cellules responsables de la myélinisation, enroulent leur membrane cellulaire autour des axones pour soutenir la conduction de l’influx nerveux. Avec Arivis, l'équipe de biothérapeutiques de Charles River à Leiden a réussi à quantifier les cellules oligodendrocytes et la myélinisation des neurites dans un nouveau modèle de co-culture, fournissant ainsi un outil clé pour étudier l'une des principales caractéristiques de troubles neurologiques courants. ​

Graphique 3. Myélinisation-Neurite/enveloppement axonal dans la co-culture de neurones ioGlutamatergic et d’ioOligodendrocytes. Les cocultures ont été colorées à l’aide de technologies immunocytochimiques pour des marqueurs neuronaux pertinents et spécifiques : le neurofilament H (NFH, en rouge) et le marqueur oligodendrocytaire MBP (en vert). Le DAPI a été utilisé pour identifier les noyaux cellulaires. Une image représentative d’une co-culture est montrée (recadrée), y compris les processus de segmentation avec Arivis qui sont nécessaires à l’évaluation de l’enveloppement axonal. La quantification de l’intersection des signaux MBP et NFH au jour 14 (graphique) montre une augmentation de la myélinisation (enveloppement) lors du traitement avec un composé de référence Tasin1, connu pour améliorer la fonction des oligodendrocytes.

Échafaudage innervé
Images de l’équipe de Charles River à Leiden

Récemment, le laboratoire a également été chargé d’étudier et d’optimiser des cellules souches embryonnaires humaines différenciées in vitro en un phénotype neuronal immature avant d’être ajoutées à un dispositif médical d’administration de cellules. Le dispositif est utilisé pour imiter et remplacer une connexion neuronale perdue dans le tissu cérébral. Cette demande était complexe car impliquait la mise en œuvre de lectures d’analyse d’images dans un cadre tridimensionnel d’un réseau dense de neurites, rendant difficile la lecture des données avec les logiciels d’analyse d’images conventionnels.

Ce nouvel outil d’analyse a permis de fournir une lecture grâce à la technologie d’apprentissage automatique intégrée au logiciel d’analyse d’images Arivis. L'équipe de recherche a pu entraîner le programme à identifier, segmenter et mesurer les structures neurites au sein du dispositif. De plus, en colorant ces neurites pour des marqueurs neuronaux pertinents et spécifiques via des technologies d’immunocytochimie, le nouvel outil d’analyse a fourni au client un montage complet - une technique de coloration utilisée pour visualiser l’échantillon entier dans sa configuration 3D naturelle - de la croissance des neurites.

Graphique 4. Échafaudage innervé - La croissance des neurites dans un dispositif médical peut être suivie via l’imagerie à haut contenu dans un environnement de cellules vivantes en marquant les cellules avec une sonde Calcein-AM. Avec Arivis, les neurites peuvent être identifiés et les caractéristiques de ces neurites (comme la longueur, la densité et la ramification) peuvent être analysées.

Une réduction de l'utilisation des modèles animaux

Pour Charles River, les modèles in vitro complexes combinés à un outil d'imagerie avancé comme Arivis peuvent contribuer de manière significative à la réduction de l'utilisation des animaux. En augmentant l'efficacité des données, il est possible de fournir aux clients des informations plus détaillées à partir d'un nombre réduit d'expériences. La technologie d'imagerie avancée, telle qu'Arivis, peut améliorer l'utilisation de modèles in vitro complexes plus pertinents sur le plan biologique. Cette augmentation des modèles prédictifs permet une meilleure compréhension des processus biologiques pertinents sans recourir aux tests sur les animaux, et respecter ainsi des normes éthiques. 

Blog Charles River

Retrouvez l'interview complète de Charles River

Plus d'informations sur l'implémentation de la solution logicielle Arivis au sein des laboratoires Charles River et interview complète de Marta Da Silva :

> Raising the Bar with High Content Analysis

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