Connectomique

La microscopie électronique à balayage (MEB) fournit la superbe résolution requise pour visualiser les connexions neuronales. L'imagerie 3D ultra résolution peut être obtenue avec l'imagerie de bloc face en série à l'aide de la gamme de microscopes électroniques ZEISS GeminiSEM ou ZEISS Sigma intégrés à 3View. La tomographie FIB-SEM peut aussi être utilisée pour la visualisation 3D des neurones à l'aide de ZEISS Crossbeam.

ZEISS a développé une nouvelle technologie de MEB multi-faisceau pour l'imagerie de larges zones d'échantillon, la gamme ZEISS MultiSEM. En partenariat avec l'ultramicrotome automatisé de collecte de bande, qui coupe l'échantillon en sections ultrafines, MultiSEM accélère considérablement l'acquisition de données 3D ultra résolution grâce à la tomographie en réseau. La cartographie de tissus cérébraux plus grands (1 mm³) à haute résolution est désormais à portée de main.

Vous pouvez rassembler les données de grands champs d'observation collectées avec un microscope à champ large tel que ZEISS Axio Observer, et les informations ultrastructurales d'un microscope électronique à balayage (MEB). Le logiciel ZEISS ZEN Connect permet de combiner les données de n'importe quelle source d'imagerie ZEISS et d'observer les interactions entre les différentes parties du cerveau et cellules neuronales impliquées.

L'exemple montre une coupe ultra-mince de cerveau de souris. L'image d'ensemble (à gauche) a été acquise par microscopie à champ large. La synapsine-1 a été marquée par Alexa Fluor 647 (vert) qui cible les vésicules présynaptiques, et à la géphyrine (rouge) avec Alexa Fluor 594 qui cible une partie du réseau protéique postsynaptique. Les noyaux ont été colorés avec DAPI (bleu). L'image d'ensemble a été utilisée pour la navigation et le déplacement des ROI. Les encadrés ont été acquis par microscopie électronique à balayage (à droite).

Les méthodes d'éclaircissement optique permettent de réaliser une microscopie de neurones marqués par fluorescence profondément dans le cerveau. La microscopie à feuillet de lumière, proposée par ZEISS Lightsheet 7, ou la microscopie confocale, comme avec la gamme ZEISS LSM 9, vous permet d'obtenir une imagerie 3D nette et haute résolution de neurones dans des cerveaux transparisés en un temps étonnamment court.