ZEISS LSM 980 avec Airyscan 2
Produit

ZEISS LSM 980 avec Airyscan 2

Votre expérience confocale unique pour une imagerie Multiplex rapide et douce

Pour analyser la vie en limitant les perturbations, une faible densité de marquage est nécessaire pour vos modèles biologiques. Cela exige d'excellentes performances d'imagerie, associées à une faible phototoxicité et à une vitesse élevée. LSM 980, la plateforme idéale pour votre imagerie confocale 4D, est conçue pour la détection spectrale simultanée de plusieurs marqueurs faibles avec une efficacité lumineuse maximale.

  • Une multitude de marqueurs fluorescents de 380 nm à 900 nm
  • Flexibilité spectrale : jusqu'à 36 canaux simultanés
  • Plus d'informations en moins de temps grâce à Airyscan 2 Multiplex
  • Élargissez vos recherches avec l'imagerie NLO, NIR, Cryo et SIM²
Image de cellules COS-7 acquise avec LSM Plus incluant le détecteur NIR ZEISS en mode canal.
Image de cellules COS-7 acquise avec LSM Plus incluant le détecteur NIR ZEISS en mode canal. Échantillon : avec l'aimable autorisation d'U. Ziegler et J. Doehner, Université de Zurich, ZMB, Suisse.
Échantillon : avec l'aimable autorisation d'U. Ziegler et J. Doehner, Université de Zurich, ZMB, Suisse.

Image de cellules Cos-7 acquise avec LSM Plus incluant le détecteur NIR de ZEISS en mode canal.

Une expérience confocale unique

Une trajectoire de faisceau performante comptant jusqu'à 36 canaux simultanés et une flexibilité spectrale totale jusqu'à la gamme du proche infrarouge (NIR) vous offrent la base parfaite pour effectuer des expériences multicolores avec des échantillons vivants. En outre, LSM Plus améliore sans effort toutes vos expériences : la combinaison unique de l'imagerie spectrale avec un rapport signal sur bruit et une résolution améliorés permet de réduire la puissance du laser pour vos expériences sur cellules vivantes.

Légende : Image de cellules COS-7 acquise avec LSM Plus incluant le détecteur NIR ZEISS en mode canal. 
Échantillon fourni avec l'aimable autorisation de U. Ziegler et J. Doehner, Université de Zurich, ZMB, Suisse.

Drosophila germarium. Image acquise avec ZEISS Airyscan 2 suivie de l'application de Joint Deconvolution.
Drosophila germarium. Image acquise avec ZEISS Airyscan 2 suivie de l'application de Joint Deconvolution. Avec l'aimable autorisation de T. Jacobs, AG Luschnig, WWU Münster ; avec T. Zobel, Réseau d'imagerie de Münster, Allemagne
Avec l'aimable autorisation de T. Jacobs, AG Luschnig, WWU Münster ; avec T. Zobel, Réseau d'imagerie de Münster, Allemagne

Drosophila germarium. Image acquise avec ZEISS Airyscan 2 suivie d'une déconvolution conjointe.

Une image qui gagne en sensibilité

L'Airyscan 2 vous conduit plus loin que n'importe quel détecteur LSM conventionnel. Chacun de ses 32 détecteurs recueille des informations supplémentaires, tout en rassemblant conjointement encore plus de lumière, pour des résultats quantitatifs en super résolution. Poussez la résolution encore plus loin en ajoutant des informations structurelles à l'application de Joint Deconvolution (jDCV). Ou utilisez les modes Multiplex pour obtenir des informations en super résolution jusqu'à 10 fois plus rapidement.

Légende : Drosophila germarium. Image acquise avec ZEISS Airyscan 2 suivie de l'application de Joint Deconvolution.
Avec l'aimable autorisation de T. Jacobs, AG Luschnig, WWU Münster ; avec T. Zobel, Réseau d'imagerie de Münster, Allemagne

ZEN BioApps : transformez vos images en données précieuses – analysez vos images avec pertinence.
ZEN BioApps : transformez vos images en données précieuses – analysez vos images avec pertinence.

ZEN BioApps : transformez vos images en données précieuses – analysez vos images avec pertinence.

Augmentez votre productivité

Le logiciel de microscopie ZEN offre une multitude de fonctionnalités pour obtenir des résultats reproductibles dans les plus brefs délais possibles. AI Sample Finder vous aide à détecter rapidement les régions d'intérêt, ce qui vous laisse davantage de temps pour vous concentrer sur vos expériences. Avec Smart Setup, utilisez les paramètres d'imagerie optimaux pour vos marqueurs fluorescents. Le traitement direct permet d'acquérir des images et de traiter des données en parallèle. ZEN Connect vous confère un contrôle total, aussi bien pendant l'imagerie que plus tard, pour partager l'historique de vos expériences.

Une trajectoire de faisceau lumineux performante

  • Une sensibilité élevée et une flexibilité spectrale par excellence pour vos expériences

    LSM 980 apporte une grande liberté à votre dispositif expérimental. La conception de la trajectoire du faisceau du LSM 980 garantit non seulement une imagerie extrêmement sensible, essentielle pour visualiser le signal le plus faible et résoudre toutes les structures, mais aussi une flexibilité spectrale, qui vous permet de sélectionner librement des marqueurs fluorescents de 380 nm à la gamme du proche infrarouge (NIR).

Chambres d'œufs de drosophile colorées pour la F-actine (phalloidine, magenta) et la DE-Cadhérine (cyan). Avec l'aimable autorisation de T. Jacobs, AG Luschnig, WWU Münster ; avec T. Zobel, Réseau d'imagerie de Münster, Allemagne
Chambres d'œufs de drosophile colorées pour la F-actine (phalloidine, magenta) et la DE-Cadhérine (cyan). Avec l'aimable autorisation de T. Jacobs, AG Luschnig, WWU Münster ; avec T. Zobel, Réseau d'imagerie de Münster, Allemagne

LSM Plus

Améliorer l'ensemble de l'expérience confocale

LSM Plus améliore littéralement toute expérience confocale avec facilité, indépendamment du mode de détection ou de la plage d'émission. Sa déconvolution par filtre de Wiener linéaire ne nécessite pratiquement aucune interaction et garantit un résultat quantitatif fiable. À l'image de notre traitement éprouvé à super résolution Airyscan, les informations sur les propriétés optiques sous-jacentes sont adaptées automatiquement en fonction de l'objectif, de l'indice de réfraction et de la plage d'émission.

Appliquez LSM Plus sans effort supplémentaire et profitez des avantages suivants :

  • Amélioration du rapport signal sur bruit à une vitesse d'acquisition élevée et à une faible puissance laser, particulièrement utile pour l'imagerie de cellules vivantes à faibles niveaux d'expression
  • Résolution améliorée des données spectrales, jusqu'à 36 canaux en un seul scan
  • Davantage d'informations spatiales et une amélioration accrue de la résolution pour les échantillons brillants qui permettent de fermer le sténopé du LSM
  • Processus intégrés pour combiner les avantages du LSM Plus avec l'imagerie à super résolution Airyscan

Légende : Chambres d'œufs de drosophile colorées pour la F-actine (phalloidine, magenta) et la DE-Cadhérine (cyan). Avec l'aimable autorisation de T. Jacobs, AG Luschnig, WWU Münster ; avec T. Zobel, Réseau d'imagerie de Münster, Allemagne

Trajectoire schématique du faisceau Airyscan 2. (1) Miroir, (2) Filtres d'émission, (3) Optique zoom, (4) Disque d'Airy, (5) Détecteur Airyscan

Trajectoire schématique du faisceau Airyscan 2

Trajectoire schématique du faisceau Airyscan 2. (1) Miroir, (2) Filtres d'émission, (3) Optique zoom, (4) Disque d'Airy, (5) Détecteur Airyscan

(1) Miroir, (2) Filtres d'émission, (3) Optique zoom, (4) Disque d'Airy, (5) Détecteur Airyscan

Airyscan 2

Une combinaison unique d'imagerie à super-résolution et de haute sensibilité

Airyscan 2 est un détecteur de zone comportant 32 éléments de détection disposés de manière circulaire. Chacun d'entre eux agit comme un petit sténopé, contribuant à capturer des informations de super-résolution, tandis que la zone complète du détecteur collecte plus de lumière que le réglage confocal standard. Cette procédure résulte en une efficacité lumineuse supérieure, parallèlement à la saisie d'informations structurelles améliorées.

Cellules de levure bourgeonnante avec la protéine localisée à la membrane interne mitochondriale (vert) et à la matrice mitochondriale (magenta). Avec l'aimable autorisation de K. Subramanian / J. Nunnari, Université de Californie, Davis, États-Unis
Cellules de levure bourgeonnante avec la protéine localisée à la membrane interne mitochondriale (vert) et à la matrice mitochondriale (magenta). Avec l'aimable autorisation de K. Subramanian / J. Nunnari, Université de Californie, Davis, États-Unis
Cellules de levure bourgeonnante avec la protéine localisée à la membrane interne mitochondriale (en vert) et à la matrice mitochondriale (magenta). Avec l'aimable autorisation de K. Subramanian / J. Nunnari, Université de Californie, Davis, États-Unis

32 vues, davantage d'informations

Déconvolution puissante avec Airyscan jDCV

Chacun des 32 éléments du détecteur Airyscan a une vue légèrement différente sur l'échantillon, et fournit donc des informations spatiales supplémentaires qui rendent possible l'application de Joint Deconvolution. La distance pouvant être résolue entre deux points est encore réduite jusqu'à 90 nm. Vos expériences de super résolution bénéficieront d'une meilleure séparation des marqueurs simples ou multiples.

« Après avoir saisi l'image du réticulum endoplasmique et des mitochondries et avoir constaté la finesse des détails après avoir appliqué Airyscan Joint Deconvolution, nous n'en croyions pas nos yeux. Nous avons pu intégrer cette nouvelle option très facilement dans nos protocoles d'imagerie. La rapidité avec laquelle les images ont été traitées nous a impressionnés et nous avons pu prendre des décisions alors que nous étions encore en train de procéder à l'imagerie. »

– Dr Kelly Subramanian, chercheuse post-doctorale, département de biologie moléculaire et cellulaire, UC Davis

Mitochondries dans une cellule d'Arabidopsis thaliana. Comparaison de l'image confocale avec Airyscan SR et Airyscan Joint Deconvolution.
 Avec l'aimable autorisation de J.-O. Niemeier, AG Schwarzländer, WWU Münster, Allemagne
Avec l'aimable autorisation de J.-O. Niemeier, AG Schwarzländer, WWU Münster, Allemagne

Mitochondries dans une cellule d'Arabidopsis thaliana. Comparaison de l'image confocale avec Airyscan SR et Airyscan Joint Deconvolution.

Mitochondries dans une cellule d'Arabidopsis thaliana. Comparaison de l'image confocale avec Airyscan SR et Airyscan Joint Deconvolution. Avec l'aimable autorisation de J.-O. Niemeier, AG Schwarzländer, WWU Münster, Allemagne.

Les modes Multiplex pour l'Airyscan 2

Grands champs de vision et volumes entiers d'échantillons en un minimum de temps

Dans les modes Multiplex, les avantages du détecteur Airyscan sont combinés à des schémas d'éclairage et de lecture adaptés, pour vous offrir le choix entre plusieurs options de parallélisation. Les modes Multiplex utilisent les connaissances sur la forme du spot laser d'excitation et sur l'emplacement des différents éléments du détecteur de zone pour extraire plus d'informations spatiales, même pendant la lecture simultanée de pixels. Cette méthode permet d'effectuer des pas plus importants lors du balayage du laser d'excitation sur le champ de vision et d'améliorer la vitesse d'acquisition. La capture de plus d'informations spatiales dans le plan du sténopé reconstruit l'image finale avec une meilleure résolution que l'échantillonnage d'acquisition.

Imagerie en super résolution efficace d'un grand champ d'observation
Imagerie en super résolution efficace d'un grand champ d'observation
Avec l'aimable autorisation d'A. Politi, J. Jakobi et P. Lenart, MPI pour la chimie biophysique, Göttingen, Allemagne.

Imagerie super-résolution efficace d'un grand champ de vision : Cellules HeLa colorées pour l'ADN (bleu, Hoechst 44432), microtubules (jaune, anti-tubuline Alexa 488) et F-actine (magenta, phalloïdine Abberior STAR Red).

Imagerie en super résolution efficace d'un grand champ d'observation : Cellules HeLa colorées pour l'ADN (bleu, Hoechst 44432), microtubules (jaune, anti-tubuline Alexa 488) et la F-actine (magenta, phalloïdine Abberior STAR Red). Avec l'aimable autorisation d'A. Politi, J. Jakobi et P. Lenart, MPI pour la chimie biophysique, Göttingen, Allemagne.

Modes Multiplex de ZEISS LSM 980

LSM 980

Airyscan SR

Multiplex SR-4Y

Multiplex SR-8Y

Multiplex CO-8Y

Parallélisation

1

4

8

8

Résolution

120/120

140/140

120/160

Confocale ou mieux

Vitesse maximale par seconde au champ d'observation maximal

0,2 (Zoom 1,7)

1,0 (Zoom 1)

2,0 (Zoom 1)

9,6 (Zoom 1)

Immunomarquage, structures fines

+++++

++++

+++

++

Immunomarquage, juxtaposition

++

++++

++++

+++

Imagerie des cellules vivantes

++

+++

++++

+++++

Dynamics Profiler​

Dynamics Profiler​

Accès aisé à la dynamique moléculaire sous-jacente​

Grâce à ZEISS Dynamics Profiler, accédez facilement à la concentration et à la dynamique moléculaires dans les échantillons vivants. Les informations recueillies avec le détecteur ZEISS Airyscan vous permettent de caractériser le comportement de diffusion hétérogène et offrent ainsi des conditions idéales pour étudier les condensats cellulaires. Les mesures du flux déterminent la vitesse et la direction du mouvement actif dans les liquides et fournissent de nouvelles données uniques liées à la microfluidique et aux organes sur puce. Explorez vos échantillons les plus délicats sans exposition excessive à la lumière ou prolongation de la durée de vos expériences et collectez un plus grand volume de données afin d'améliorer vos recherches.

Rendement quantique spectral typique (QE) des détecteurs ZEISS LSM 980, y compris le NIR.
Rendement quantique spectral typique (QE) des détecteurs ZEISS LSM 980, incluant le NIR.

Rendement quantique spectral typique (QE) des détecteurs ZEISS LSM 980, incluant le NIR.

Imagerie à infrarouge proche (NIR)

Élargissez votre plage spectrale

Élargir votre plage spectrale dans l'infrarouge proche vous permet d'utiliser en parallèle un plus grand nombre de marquages. Dans vos expériences multicolores, visualisez des structures supplémentaires avec plus de colorants, grâce aux détecteurs Quasar et NIR qui prennent efficacement en charge les expériences de multiplexage spectral. Les marquages fluorescents NIR sont moins phototoxiques pour les échantillons vivants en raison de leur longueur d'onde plus grande. Vous avez donc la possibilité d'étudier des échantillons vivants pendant de plus longues périodes en limitant l'influence de la lumière. En outre, la lumière de plus grandes longueurs d'onde est moins diffusée par l'échantillon de tissu, ce qui augmente la profondeur de pénétration.

Pour les nombreux avantages que vous recherchez avec les marquages NIR, le détecteur NIR à double canal combine deux technologies de détection (GaAsP et GaAs à rouge étendu) pour une sensibilité optimale jusqu'à 900 nm.

Imagerie à infrarouge proche (NIR)
Cellules Cos-7, DAPI (magenta), anti-tubuline Alexa 568 (bleu), actine phalloïdine OG488 (jaune) et Tom20-Alexa 750 (rouge).
Cellules COS-7, DAPI (magenta), anti-tubuline Alexa 568 (bleu), actine phalloïdine-OG488 (jaune) et Tom20-Alexa 750 (rouge). Échantillon : avec l'aimable autorisation de Urs Ziegler et Jana Doehner, Université de Zurich, ZMB, Suisse.
Échantillon : avec l'aimable autorisation de Urs Ziegler et Jana Doehner, Université de Zurich, ZMB, Suisse.

Cellules Cos-7, DAPI (magenta), anti-tubuline Alexa 568 (bleu), actine phalloïdine OG488 (jaune) et Tom20-Alexa 750 (rouge).

Image acquise en mode Lambda à travers le spectre visible et NIR. Signaux individuels séparés par ségrégation linéaire. Projection de l'intensité maximale de la pile Z.

Cellules Cos-7

Cellules Cos-7, DAPI (magenta), anti-tubuline Alexa 568 (bleu), actine phalloïdine OG488 (jaune) et Tom20-Alexa 750 (rouge). Image acquise en mode Lambda à travers le spectre visible et NIR. Signaux individuels séparés par ségrégation linéaire. Projection de l'intensité maximale de la pile Z.

Échantillon : avec l'aimable autorisation de Urs Ziegler et Jana Doehner, Université de Zurich, ZMB, Suisse.

Comparaison de ZEISS LSM 980 MA-PMT et du détecteur NIR GaAsP ZEISS ; excitation au laser 639 nm à puissance de laser identique. La plage d'émission du MA-PMT est réglée sur 660 – 757 nm, et pour le détecteur NIR sur 660 – 900 nm.
Comparaison de ZEISS LSM 980 MA-PMT et du détecteur NIR GaAsP ZEISS ; excitation au laser 639 nm à puissance de laser identique. La plage d'émission du MA-PMT est réglée sur 660 – 757 nm, et pour le détecteur NIR sur 660 – 900 nm.

Microtubules de la cellule Cos-7 (Anti-Tubuline AF700)

Comparaison du détecteur ZEISS LSM 980 MA-PMT (gauche) et du détecteur NIR GaAsP ZEISS (droite) ; excitation au laser 639 nm à puissance de laser identique. La plage d'émission du MA-PMT est réglée sur 660 – 757 nm, et pour le détecteur NIR sur 660 – 900 nm.

Échantillon fourni avec l'aimable autorisation de Urs Ziegler et Jana Doehner, Université de Zurich, ZMB, Suisse.

Avant le traitement LSM Plus
Après le traitement LSM Plus

Imagerie spectrale simultanée

Séparation rapide et sensible de toutes les étiquettes fluorescentes

Pour séparer les signaux qui se chevauchent fortement ou éliminer l'autofluorescence, effectuez un Scan Lambda avec toute la gamme de détection utilisant jusqu'à 36 détecteurs, en réduisant au minimum l'éclairage et le temps nécessaires. Avec LSM Plus, améliorez l'imagerie spectrale sur toute la gamme de longueurs d'onde, y compris l'empreinte en ligne.

L'exemple montre un muscle crémaster murin, marqué en plusieurs couleurs avec Hoechst (bleu), Prox-1 Alexa488 (vert), cellules neutrophiles Ly-GFP, PECAM1 Dylight549 (jaune), SMA Alexa568 (orange), VEGEF-R3 Alexa594 (rouge), plaquettes Dylight 649 (magenta). Acquis avec un détecteur GaAsP à 32 canaux utilisant le système d'empreinte en ligne.

Légende : Comparaison du rapport signal sur bruit amélioré avant et après le traitement LSM Plus. Avec l'aimable autorisation du Dr S. Volkery, MPI pour la biomédecine moléculaire, Münster, Allemagne

Diagramme énergétique de la microscopie à deux photons

Diagramme énergétique de la microscopie à deux photons

Diagramme énergétique de la microscopie à deux photons

Microscopie multiphotonique avec LSM 980 NLO

Imagerie tissulaire profonde non invasive d'échantillons vivants ou fixes

La microscopie multiphotonique (microscopie à deux photons, microscopie optique non linéaire, NLO) est une méthode privilégiée pour l'imagerie tissulaire non invasive et profonde d'échantillons vivants ou fixés, notamment en neurosciences. La microscopie multiphotonique s'appuie sur la moindre absorbance et diffusion par les tissus des grandes longueurs d'onde (600 à 1300 nm), qui pénètrent donc plus profondément dans l'échantillon en formant un point focal. L'énergie nécessaire pour exciter un colorant fluorescent n'est pas fournie par un seul photon, mais par deux photons apportant chacun la moitié de l'énergie. La probabilité que deux photons atteignent le fluorophore en même temps n'est suffisante qu'au point focal. C'est pourquoi la lumière d'émission provient du plan focal et peut être efficacement détectée, générant une section optique sans sténopé.

Légende : Diagramme énergétique de la microscopie à deux photons

Microscopie multiphotonique avec LSM 980 NLO

Combiner les capacités confocales et multiphotoniques

Un microscope à balayage laser qui dispose de capacités confocales et multiphotoniques vous donne accès aux deux technologies pour s'adapter au mieux à vos expériences :

  • Combinez une pénétration profonde des tissus avec une sensibilité, une résolution et une vitesse accrues.
  • Réduisez l'exposition à la lumière et obtenez des séparations claires de tous les signaux d'émission
  • Collectez efficacement la lumière grâce à des détecteurs GaAsP NDD haute sensibilité et proches du signal
  • Visualisez des structures non colorées à l'aide de l'excitation multiphotonique par génération de deuxième ou troisième harmonique (SHG, THG).
Image acquise par excitation au laser à deux photons à 1000 nm, traitée avec LSM Plus.
Échantillon : avec l'aimable autorisation de la Fish Facility, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Jena, Allemagne
Vascularisation du cerveau postérieur du poisson zèbre. Image acquise par excitation au laser à deux photons à 1000 nm, traitée avec LSM Plus.
Le volume de 100 µm a été acquis par excitation laser à deux photons à 1000 nm avec le détecteur non descanné GaAsP BiG.2. L'ensemble de données a été codé en couleur pour la profondeur et une projection orthogonale a été créée avec ZEN blue. Échantillon : avec l'aimable autorisation du Prof. J. Herms, LMU, Munich, Allemagne.
Tranche de cerveau de souris avec marquage GFP cytoplasmique neuronal
Principe de la spectroscopie de corrélation de fluorescence (FCS). Trajectoire d'une particule fluorescente à travers le volume de détection

Principe de la spectroscopie de corrélation de fluorescence (FCS).

Principe de la spectroscopie de corrélation de fluorescence (FCS). Trajectoire d'une particule fluorescente à travers le volume de détection

Trajectoire d'une particule fluorescente à travers le volume de détection

Les données au-delà de l'imagerie

Plus d'options pour votre recherche

Combinant un éclairage ponctuel par laser, un balayage linéaire et des détecteurs capables de capturer le signal en mode comptage de photons, LSM 980 est bien plus qu'un dispositif d'imagerie :

  • Spectroscopie par corrélation d'images matricielles (RICS)
  • Spectroscopie de corrélation de fluorescence (FCS)
  • Spectroscopie fluorescente à corrélation croisée (FCCS)
  • Transfert d'énergie par résonance de Förster (FRET)
  • Redistribution de fluorescence après photoblanchiment (FRAP)
  • Microscopie d'imagerie par fluorescence à durée de vie (FLIM)


Légende : Principe de la spectroscopie de corrélation de fluorescence (FCS). Trajectoire d'une particule fluorescente à travers le volume de détection

Applications

ZEISS LSM 980 en action

  • Cellules COS-7 anti-TOM20 AF750 (rouge), anti-tubuline AF700 (cyan), actine phalloïdine-OG488 (magenta), DAPI (orange).
  • Signaux fluorescents séparés. La comparaison illustre à quel point LSM Plus améliore le rapport signal sur bruit et la résolution.
  • Cellules COS-7 anti-TOM20 AF750 (rouge), anti-tubuline AF700 (cyan), actine phalloïdine-OG488 (magenta), DAPI (orange).

    Image capturée avec LSM Plus, ainsi que le détecteur proche IR ZEISS dans le mode de canal.

    Cellules Cos-7 Anti-TOM20 AF750 (rouge), anti-tubuline AF700 (cyan), actine phalloïdine-OG488 (magenta), DAPI (orange).  Échantillon : avec l'aimable autorisation d'U. Ziegler et J. Doehner, Université de Zurich, ZMB, Suisse.
    Échantillon : avec l'aimable autorisation d'U. Ziegler et J. Doehner, Université de Zurich, ZMB, Suisse.

    La séparation des signaux fluorescents par ségrégation linéaire a permis de distinguer clairement les colorants Alexa 700 et 750, dont les spectres se chevauchent.

    Cellules COS-7 anti-TOM20 AF750 (rouge), anti-tubuline AF700 (cyan), actine phalloïdine-OG488 (magenta), DAPI (orange).

  • Signaux fluorescents séparés. La comparaison illustre à quel point LSM Plus améliore le rapport signal sur bruit et la résolution.

    Signaux fluorescents séparés. La comparaison illustre à quel point LSM Plus améliore le rapport signal sur bruit et la résolution.

    Cellules Cos-7 Anti-TOM20 AF750 (rouge), anti-tubuline AF700 (cyan), actine phalloïdine-OG488 (magenta), DAPI (orange). Image acquise avec le LSM Plus incluant le détecteur ZEISS NIR en mode canal. Échantillon : avec l'aimable autorisation d'U. Ziegler et J. Doehner, Université de Zurich, ZMB, Suisse.
    Échantillon : avec l'aimable autorisation d'U. Ziegler et J. Doehner, Université de Zurich, ZMB, Suisse.

    Cellules Cos-7 Anti-TOM20 AF750 (rouge), anti-tubuline AF700 (cyan), actine phalloïdine-OG488 (magenta), DAPI (orange). Image acquise avec le LSM Plus incluant le détecteur ZEISS NIR en mode canal.

    La séparation des signaux fluorescents par ségrégation linéaire a permis de distinguer clairement les colorants Alexa 700 et 750, dont les spectres se chevauchent.

    Signaux fluorescents séparés. La comparaison illustre à quel point LSM Plus améliore le rapport signal sur bruit et la résolution.

NIR : augmenter le nombre de marqueurs

Pour capturer le monde complexe de la biologie, la possibilité d'augmenter le nombre de marqueurs est un avantage considérable. Le LSM 980 peut acquérir simultanément l'image de plusieurs marqueurs et couvrir une large gamme d'émissions jusqu'à 900 nm. Ces cellules Cos-7 ont été marquées avec 4 fluorophores, dont deux ont leur pic d'émission dans le proche infrarouge (NIR), Alexa 700 et Alexa 750. En utilisant le LSM 980 Quasar et des détecteurs NIR, tous les marqueurs ont été représentés avec une sensibilité optimale. Les vues en zoom illustrent la manière dont LSM Plus améliore le rapport signal/bruit et la résolution.

  • Neurones de cerveau de cafard (Alexa 488 : jaune, Alexa 647 : magenta) et ADN (Hoechst : cyan), sans LSM Plus.
    Neurones de cerveau de cafard (Alexa 488 : jaune, Alexa 647 : magenta) et ADN (Hoechst : cyan), avec LSM Plus.

    LSM Plus

    Neurones de cerveau de cafard (Alexa 488 : jaune, Alexa 647 : magenta) et ADN (Hoechst : cyan), sans (à gauche) et avec LSM Plus (à droite).

    Avec l'aimable autorisation de M. Paoli, Laboratoire Galizia, Université de Constance, Allemagne

  • Coloration à la F-actine (phalloïdine) d'un canal annulaire dans la chambre d'œuf d'une drosophile.
    Coloration à la F-actine (phalloïdine) d'un canal annulaire dans la chambre d'œuf d'une drosophile.

    Déconvolution commune Airyscan

    Coloration à la F-actine (Phalloidine) d'un canal annulaire dans la chambre d’œuf de la drosophile.

    Avec l'aimable autorisation de T. Jacobs, AG Luschnig, WWU Münster ; avec T. Zobel, Réseau d'imagerie de Münster, Allemagne

  • Cervelet de souris marqué avec l'anti-calbindine (Alexa-568) et anti-GFAP (Alexa-488)
  • Cervelet de souris marqué avec l'anti-calbindine (Alexa-568) et anti-GFAP (Alexa-488).
  • Cervelet de souris marqué avec l'anti-calbindine (Alexa-568) et anti-GFAP (Alexa-488).
  • Système vasculaire cérébral et oculaire du poisson zèbre (vert) et génération de deuxième harmonique (gris) en orientation sagittale.
  • Cervelet de souris marqué avec l'anti-calbindine (Alexa-568) et anti-GFAP (Alexa-488). Les deux fluorophores ont été excités par le laser à deux photons à 780 nm et les spectres d'émission ont été collectés simultanément par le détecteur BIG.2. La juxtaposition et l'assemblage 3D couvrent l'ensemble de la structure et une projection orthogonale a été créée dans ZEN Blue. Des zones d'intérêt spécifiques imagées à l'aide du détecteur Airyscan 2 offrent des images haute résolution des cellules de Purkinje. Après le traitement des ensembles de données Airyscan 2, ZEN Blue a créé des projections orthogonales. ZEN Connect a aligné les images individuelles en superrésolution avec le cervelet. Avec l'aimable autorisation de L. Cortes, Université de Coimbra, Portugal.
  • Cervelet de souris marqué avec l'anti-calbindine (Alexa-568) et anti-GFAP (Alexa-488).
    Cervelet de souris marqué avec de l'anti-calcaire (Alexa-568) et de l'anti-GFAP (Alexa-488).  Échantillon : avec l'aimable autorisation de L. Cortes, Université de Coimbra, Portugal.
    Échantillon : avec l'aimable autorisation de L. Cortes, Université de Coimbra, Portugal.

    Cervelet de souris marqué avec l'anti-calbindine (Alexa-568) et anti-GFAP (Alexa-488).

  • Cervelet de souris marqué avec l'anti-calbindine (Alexa-568) et anti-GFAP (Alexa-488).
    Cervelet de souris marqué avec de l'anti-calcaire (Alexa-568) et de l'anti-GFAP (Alexa-488).  Échantillon : avec l'aimable autorisation de L. Cortes, Université de Coimbra, Portugal.
    Échantillon : avec l'aimable autorisation de L. Cortes, Université de Coimbra, Portugal.

    Cervelet de souris marqué avec de l'anti-calcaire (Alexa-568) et de l'anti-GFAP (Alexa-488).

    Cervelet de souris marqué avec l'anti-calbindine (Alexa-568) et anti-GFAP (Alexa-488).

  • Système vasculaire cérébral et oculaire du poisson zèbre (vert) et génération de deuxième harmonique (gris) en orientation sagittale. Un volume de 267 μm a été acquis avec le laser à deux photons à 1,000 nm et l'émission a été détectée avec le détecteur GaAsP BIG.2. La SHG a permis de visualiser les structures tissulaires, telles que les cellules de la rétine et les muscles oculaires. Échantillon : avec l'aimable autorisation de la Fish Facility, Institut Leibniz pour la recherche sur le vieillissement - Institut Fritz Lipmann e.V. (FLI), Jena, Allemagne.

Microscopie multiphotons

Associée à la juxtaposition et l'assemblage 3D, la microscopie multiphotonique permet d'obtenir des images de grands échantillons, comme cet exemple de cervelet de souris. L'imagerie Airyscan 2 en mode super résolution permet d'acquérir des images en super résolution de zones d'intérêt spécifiques et se combine facilement à l'imagerie à deux photons. ZEN Connect rassemble toutes les informations issues de vos diverses expériences. Vous pouvez ainsi cartographier des images en haute résolution sur la structure plus large, en conservant le contexte et en simplifiant l'organisation de vos fichiers.

  • Avec l'aimable autorisation de M. Paoli, Laboratoire Galizia, Université de Constance, Allemagne.

Imagerie 3D et 4D

Les ganglions cérébraux, thoraciques et abdominaux du cafard sont reliés entre eux par des faisceaux conjonctifs bilatéraux d'interneurones ascendants et descendants formant la chaîne nerveuse ventrale. Dans cette préparation, les connectifs gauche et droit ont été marqués individuellement (Alexa 488 : vert, Alexa 647 : magenta) en arrière du ganglion sous-œsophagien pour observer l'extension de leur innervation au sein des différents neurophiles, et dans l'ensemble des parties ipsi et contralatérales du cerveau (ADN marqué au DAPI : cyan). L'imagerie a été réalisée à l'aide de la méthode de juxtaposition et d'assemblage pour capturer le volume total (3 × 2,3 × 0,26 mm). L'animation 3D de l'ensemble des données a été réalisée avec arivis Vision 4D, idéale pour le rendu et l'analyse de grands ensembles de données. La visionneuse 4D d'arivis Vision 4D peut être configurée pour ajuster indépendamment l'apparence de chaque canal et mettre en évidence des caractéristiques spécifiques.

Ces paramètres, ainsi que les plans d'écrêtage ou l'opacité variable des canaux individuels, peuvent être stockés dans des images clés que le logiciel interpole automatiquement pour produire une animation lisse et continue. Ces animations peuvent être prévisualisées et modifiées avant de produire un rendu vidéo en haute résolution.

  • Coupe tissulaire colorée d'un intestin de souris pour la substance P (cyan, Alexa 488) marquant les contacts présynaptiques dans le système nerveux entérique, HuC/D (jaune, Alexa 568) marquant les neurones entériques, et la synthase d'oxyde nitrique neuronale (nNOS, rouge, Alexa 750) marquant une sous-population de neurones entériques. Échantillon : avec l'aimable autorisation de Pieter Vanden Berghe, LENS & CIC, Université de Louvain, Belgique.
  • Ce projet ZEN Connect documente l'expérience réalisée avec l'explant tissulaire épendymaire du système ventriculaire d'un cerveau de souris.
  • Une vue d'ensemble des cils mobiles marqués par fluorescence sur l'explant tissulaire épendymaire du cerveau de la souris est rapidement acquise grâce à la juxtaposition avec Airyscan 2 en mode Multiplex CO-8Y pour trouver des régions d'intérêt.
  • Imagerie en direct avec 143 images par seconde des cils mobiles marqués par fluorescence de l'épendyme du cerveau.
  • Coupe tissulaire colorée d'un intestin de souris pour la substance P (cyan, Alexa 488) marquant les contacts présynaptiques dans le système nerveux entérique, HuC/D (jaune, Alexa 568) marquant les neurones entériques, et la synthase d'oxyde nitrique neuronale (nNOS, rouge, Alexa 750) marquant une sous-population de neurones entériques. Échantillon : avec l'aimable autorisation de Pieter Vanden Berghe, LENS & CIC, Université de Louvain, Belgique.
    Coupe tissulaire colorée d'un intestin de souris pour la substance P (cyan, Alexa 488) marquant les contacts présynaptiques dans le système nerveux entérique, HuC/D (jaune, Alexa 568) marquant les neurones entériques, et la synthase d'oxyde nitrique neuronale (nNOS, rouge, Alexa 750) marquant une sous-population de neurones entériques. Échantillon : avec l'aimable autorisation de Pieter Vanden Berghe, LENS & CIC, Université de Louvain, Belgique. Échantillon : avec l'aimable autorisation de Pieter Vanden Berghe, LENS & CIC, Université de Louvain, Belgique.
    Échantillon : avec l'aimable autorisation de Pieter Vanden Berghe, LENS & CIC, Université de Louvain, Belgique.

    Coupe tissulaire colorée d'un intestin de souris pour la substance P (cyan, Alexa 488) marquant les contacts présynaptiques dans le système nerveux entérique, HuC/D (jaune, Alexa 568) marquant les neurones entériques, et la synthase d'oxyde nitrique neuronale (nNOS, rouge, Alexa 750) marquant une sous-population de neurones entériques. 

    Coupe tissulaire colorée d'un intestin de souris pour la substance P (cyan, Alexa 488) marquant les contacts présynaptiques dans le système nerveux entérique, HuC/D (jaune, Alexa 568) marquant les neurones entériques, et la synthase d'oxyde nitrique neuronale (nNOS, rouge, Alexa 750) marquant une sous-population de neurones entériques. Échantillon : avec l'aimable autorisation de Pieter Vanden Berghe, LENS & CIC, Université de Louvain, Belgique.

  • Ce projet ZEN Connect documente l'expérience réalisée avec l'explant tissulaire épendymaire du système ventriculaire d'un cerveau de souris.
    Ce projet ZEN Connect documente l'expérience réalisée avec l'explant tissulaire épendymaire du système ventriculaire d'un cerveau de souris.

    Ce projet ZEN Connect documente l'expérience réalisée avec l'explant tissulaire épendymaire du système ventriculaire d'un cerveau de souris. Toutes les données acquises lors de la session d'expérience sont conservées dans leur contexte. Les images d'ensemble acquises par la caméra et le LSM permettent d'enregistrer avec précision l'emplacement du battement ciliaire au sein de l'échantillon. La carte des flux générés par les cils le long de la paroi épendymaire est ajoutée en référence.

  • Une vue d'ensemble des cils mobiles marqués par fluorescence sur l'explant tissulaire épendymaire du cerveau de la souris est rapidement acquise grâce à la juxtaposition avec Airyscan 2 en mode Multiplex CO-8Y pour trouver des régions d'intérêt.
    Une vue d'ensemble des cils mobiles marqués par fluorescence sur l'explant tissulaire épendymaire du cerveau de la souris est rapidement acquise grâce à la juxtaposition avec Airyscan 2 en mode Multiplex CO-8Y pour trouver des régions d'intérêt.

    Une vue d'ensemble des cils mobiles marqués par fluorescence sur l'explant tissulaire épendymaire du cerveau de la souris est rapidement acquise grâce à la juxtaposition avec Airyscan 2 en mode Multiplex CO-8Y pour trouver des régions d'intérêt. Pile Z affichée en code couleur de profondeur. La position exacte des cils mobiles enregistrés est documentée.

  • Imagerie en direct avec 143 images par seconde des cils mobiles marqués par fluorescence de l'épendyme du cerveau. Acquisition avec le mode Airyscan CO-8Y combinant la qualité d'image et la vitesse ; pour une analyse détaillée de la direction et de la fréquence des battements ciliaires. © Avec l'aimable autorisation de G. Eichele, Institut Max Planck pour la chimie biophysique, Göttingen, Allemagne.

Navigation et corrélations en toute simplicité

Le monde de la microscopie passe progressivement à des échantillons plus grands, d'où l'importance croissante de maintenir le contexte positionnel et de conserver un enregistrement des zones capturées. AI Sample Finder classe automatiquement le porte-échantillon, identifie l'échantillon, effectue la mise au point et crée une image d'ensemble rapide à l'aide du photomultiplicateur T ou de la caméra. Naviguez librement en utilisant l'image d'ensemble pour vous orienter et vous déplacer aisément vers les structures intéressantes. Optimisez votre temps et imagez uniquement les régions qui contiennent des informations pertinentes pour vos recherches. ZEN Connect met en corrélation toutes les données associées à l'échantillon.

Dans cet exemple, le tissu intestinal de la souris a été marqué avec trois fluorophores couvrant un spectre d'émission de 500 à 850 nm. AI Sample Finder a automatiquement identifié le support et a créé une image d'ensemble avec le photomultiplicateur T pour capturer le marqueur Alexa 488. L'image d'ensemble sert à naviguer dans l'échantillon et à identifier les régions d'intérêt. ZEISS LSM 980 Quasar et les détecteurs NIR ont été utilisés pour acquérir des images des marqueurs visibles et invisibles avec une sensibilité optimale.

Téléchargements

    • ZEISS LSM 980 with Airyscan 2

      Your Unique Confocal Experience for Fast and Gentle Multiplex Imaging

      Pages: 44
      Taille du fichier: 8 MB
    • Flyer: ZEISS LSM 980 with Airyscan 2

      Your Unique Confocal Experience for Fast and Gentle Multiplex Imaging

      Pages: 4
      Taille du fichier: 1 MB
    • ZEISS Dynamics Profiler

      Your Easy Access to Underlying Molecular Dynamics in Living Samples

      Pages: 6
      Taille du fichier: 2 MB
    • ZEISS Dynamics Profiler

      Follow dynamic biological processes and reveal spatial molecular characteristics

      Pages: 16
      Taille du fichier: 3 MB
    • The Basic Principle of Airyscanning

      Pages: 22
      Taille du fichier: 1 MB
    • ZEISS LSM 9 Family with Airyscan 2

      Multiplex Mode for Fast and Gentle ConfocalSuperresolution in Large Volumes

      Pages: 11
      Taille du fichier: 3 MB
    • A Practical Guide of Deconvolution

      Pages: 24
      Taille du fichier: 2 MB

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