Captura de imágenes en directo de embrión de pez cebra desde 4 vistas: vista 4 Dr. Lingfei Luo, Escuela de Ciencias de la Vida, Universidad del Suroeste, China
Aplicaciones de microscopía para ciencias de la vida

Captura de imágenes de organismos modelo grandes

Fijados o vivos

A la hora de captar imágenes de organismos modelo grandes, puede resultar difícil lograr una captura de imágenes de alta resolución de detalles diminutos ocultos en las profundidades de sus muestras. El espécimen puede ser demasiado grueso o denso para su sistema actual de captura de imágenes. O puede que se enfrente al desafío de la insuperable cantidad de tiempo requerida para captar todo el organismo con la resolución deseada.

Si está creando vídeos a cámara rápida de organismos vivos grandes, necesitará minimizar la fototoxicidad, el fotodaño o los efectos biológicos y artefactos inducidos por la iluminación.

 

  • Embrión de Drosophila
  • Arabidopsis viva
  • LSFM de embrión de pez cebra con hoja de luz
  • Embrión de Drosophila captado con modo Airyscan Multiplex. Muestra cortesía de J. Sellin, LIMES, Alemania
    Embrión de Drosophila captado con modo Airyscan Multiplex. Muestra cortesía de J. Sellin, LIMES, Alemania

    Embrión de Drosophila captado con modo Airyscan Multiplex. Muestra cortesía de J. Sellin, LIMES, Alemania

    Embrión de Drosophila captado con modo Airyscan Multiplex. Muestra cortesía de J. Sellin, LIMES, Alemania

  • Arabidopsis viva que expresa un indicador de un gen que responde a la hormona citoquinina. Captada con Airyscan. Imagen cortesía del Instituto Médico Howard Hughes, Instituto de Tecnología de California, EE. UU.
    Arabidopsis viva que expresa un indicador de un gen que responde a la hormona citoquinina. Captada con Airyscan. Imagen cortesía del Instituto Médico Howard Hughes, Instituto de Tecnología de California, EE. UU.

    Arabidopsis viva que expresa un indicador de un gen que responde a la hormona citoquinina. Captada con Airyscan. Imagen cortesía del Instituto Médico Howard Hughes, Instituto de Tecnología de California, EE. UU.

    Arabidopsis viva que expresa un indicador de un gen que responde a la hormona citoquinina. Captada con Airyscan. Imagen cortesía del Instituto Médico Howard Hughes, Instituto de Tecnología de California, EE. UU.

  • Desarrollo de embrión de pez cebra captado con microscopía basada en hoja de luz. Cortesía de Jade Li, Diane Sepich, Lila Solnica Krezel, Facultad de Medicina de la Universidad de Washington, EE. UU.

Captura de imágenes en 3D de organismos modelo

Con rapidez y alta resolución

Las muestras gruesas requieren tecnologías que eliminen de forma efectiva la luz desenfocada. También puede resultar imposible captar imágenes de organismos grandes en su totalidad debido a las limitaciones de tiempo. Los innovadores microscopios basados en hoja de luz, como ZEISS Lightsheet 7, utilizan la iluminación planar solamente para excitar el plano deseado y captan imágenes rápidamente, mejorando el rendimiento de las muestras fijadas o captando eventos dinámicos de su organismo modelo grande. Los microscopios confocales, como la familia ZEISS LSM 9, son efectivos bloqueando la luz desenfocada y se pueden equipar con el modo Multiplex de Airyscan para superresolución sensible con un tiempo de captura reducido.

Embriogénesis de grillo captada durante cinco días usando microscopía automatizada. Muestra cortesía de S. Donoughe, Universidad de Harvard, EE. UU.

Captura de imágenes prolongada a cámara rápida de organismos en desarrollo

Tradicionalmente, se necesitaba luz de iluminación intensa para excitar los fluoróforos escondidos en las profundidades de los organismos modelo vivos. Esta luz puede ser tóxica para la muestra, blanquear los marcadores fluorescentes y, posiblemente, causar comportamientos inducidos por la iluminación, imposibilitando la captura de imágenes prolongada a cámara rápida para documentar cómo se desarrollan los organismos de forma natural. Los sistemas de ZEISS, ya sean sistemas confocales, basados en hoja de luz o automatizados para muestras vivas (ZEISS Celldiscoverer 7), requieren una mínima luz de excitación, lo cual asegura una captura de imágenes extremadamente delicada que le permite captar imágenes de sus organismos en desarrollo durante horas o días.

Antebrazo de salamandra (ajolote)
Antebrazo de salamandra (ajolote)

Antebrazo de salamandra (ajolote), limpiado ópticamente, imagen captada con microscopía basada en hoja de luz. Imagen cortesía de Wouter Masselink y Elly Margaret Tanaka, IMP – Instituto de investigación de patología molecular, Austria

Antebrazo de salamandra (ajolote), limpiado ópticamente, imagen captada con microscopía basada en hoja de luz. Imagen cortesía de Wouter Masselink y Elly Margaret Tanaka, IMP – Instituto de investigación de patología molecular, Austria

Llegue a nuevas profundidades con muestras limpiadas

La limpieza del tejido óptico ha permitido la captura de imágenes a mucha más profundidad en especímenes grandes. La microscopía basada en hoja de luz, como con Lightsheet 7, o la microscopía confocal, como con la familia LSM 9, le permite conseguir imágenes en 3D nítidas y de alta resolución de ranas, ratones u otros organismos modelo grandes limpiados en un periodo de tiempo sorprendentemente breve.

Visualización de varios órganos en un embrión de ratón embutido en resina
Visualización de varios órganos en un embrión de ratón embutido en resina

Visualización de varios órganos en un embrión de ratón embutido en resina con microscopía de rayos X. Muestra cortesía del Hospital general de Massachusetts, EE. UU.

Visualización de varios órganos en un embrión de ratón embutido en resina con microscopía de rayos X. Muestra cortesía del Hospital general de Massachusetts, EE. UU.

Captura de imágenes histológica y no destructiva en 3D

La microscopía de rayos X ofrece la captura de imágenes histológica y no destructiva en 3D de organismos modelo enteros. Los tejidos y órganos individuales, como el ojo, el cerebro o el riñón, se pueden estudiar histológicamente sin disección, dentro del organismo a nivel celular. En función de su aplicación, ZEISS Xradia Context microCT permite el escaneo rápido de muestras grandes, ZEISS Xradia Versa es adaptable para aplicaciones versátiles y ZEISS Xradia Ultra proporciona la máxima resolución en 3D.

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