蔡司Dynamics Profiler​
产品

蔡司Dynamics Profiler​ 助您轻松获得活体样品中隐藏的分子动力学信息​

仅需一次简单轻松的测量,即可了解活体样品中荧光蛋白的分子浓度、非对称扩散和流动动态。从细胞培养、类器官到整个生物体——您可轻松对当前实验中的分子进行更深入的剖析。

  • 轻松获得分子动力学信息​
  • 深入了解您的活体样品​
  • 使用非对称扩散和流动分析获得新发现​

为活体成像增添新维度​

查看蔡司Dynamics Profiler的实际应用​

Dynamics Profiler用户界面相关性

轻松获得分子动力学信息​

内置质量控制的向导式测量​

分子动力学实验常常因缺乏设备或必要的训练有素的人员而受到限制。Dynamics Profiler功能可轻松添加至配备Airyscan检测器的蔡司共聚焦显微镜,借助它,任何经验丰富的共聚焦显微镜用户均可在进行传统共聚焦成像的基础上,收集感兴趣蛋白质的分子浓度和动力学信息。向导式工作流能确保准确的采集设置和数据质量控制,配合参考图像有助于记录样品情况和测量位置,并得到易于理解的可视化数据,让您能够直观了解所获取的信息。

非对称扩散Airyscan检测器

从您的活体样品中获得新信息​

为您当前的实验添加动力学测量​

此前,尽管存在局限性(如每个样品只能测量一次以及曝光带来的光毒性水平激增等),共聚焦用户仍然使用了荧光漂白后恢复(FRAP)等技术来测量分子动力学信息。传统荧光相关光谱技术(FCS)可用于准确测量荧光蛋白浓度,但需要额外的设备,而且该技术即便对经验丰富的用户来说也具有挑战性。Dynamics Profiler是一款拥有直观易用界面的工具,可轻松在共聚焦成像实验中快速且几乎无光损伤地同步获取数据。该技术由FCS技术发展而来,可轻松应对明亮和具有挑战性样品的检测任务。

Dynamics Profiler用户界面流动

追求分子动态新发现​

空间相关信息提供非对称扩散和流动分析​

使用传统的荧光相关光谱技术(FCS),分子测量仅局限于单一激发体积;而通过使用Airyscan面阵列检测器,Dynamics Profiler加入了空间信息,从而得以在单次测量中进行新颖、深入的分子轮廓分析。非对称扩散分析工具可以利用点扩散函数捕捉非对称扩散行为,例如形成细胞内聚集物的液-液相分离界面。流动分析工具能够测量单个激发体积内荧光分子的速度和方向,非常适合用于溶液中分子的主动运动,如血流或微流控系统(如器官芯片)中的生物学过程。每次测量得到的原始数据都可用于进一步的定制化分析。

Dynamics Profiler原理

技术洞见​

Airyscan能够对更明亮的样品进行FCS检测,并添加新的空间信息。​

荧光相关光谱(FCS)是一种研究分子特征的成熟方法,虽然这一方法精确且灵敏度高,但一般仅限于极低的表达水平或分子浓度,可能远远低于活体样品中的实验表达水平。 ​

蔡司Airyscan检测器巧妙利用了其所有检测单元,每次测量可收集32个单独的FCS强度变化。19个内侧检测单元获取的数据平均值提供了对分子浓度和动力学信息的可靠测量,即使是明亮样品也不例外。此外,Airyscan面阵列检测器可利用单个检测器单元的不同组合来进行各种空间互相关分析。

  • 浓度和扩散测量​

    通过Airyscan检测器内测的19个检测单元收集分子浓度和扩散数据。独立检测器的读出能够在比传统FCS技术高得多的总强度(亮度)下进行测量。​

  • 非对称扩散测量​

    非对称扩散分析通过将检测器的中心单元与外环单元互相关来进行计算,从而揭示一个激发体积内分子运动的异质特征,非常适合研究细胞内聚集物等样品。​

  • 流体测量​

    检测器单元沿激发体积在多个方向上进行组合和排列,能够测量主动运动分子的速度和方向,如微流控系统或血流中的荧光基团。​

蔡司Dynamics Profiler应用案例​

分子动力学测量的应用案例​

果蝇蛋白质浓度测量

分子动力学测量的应用案例​

果蝇蛋白质浓度测量

样品由德国奥斯纳布吕克大学动物学和发育生物学系的Achim Paululat教授和Christian Meyer博士提供​

样品由德国奥斯纳布吕克大学动物学和发育生物学系的Achim Paululat教授和Christian Meyer博士提供​

比较不同细胞中的分子浓度​

荧光蛋白动力学特征和浓度测量可轻松添加至共聚焦实验中。样品显示了定位于第三内含子的Hand心源性和造血增强子(Han & Olson, 2005)控制下表达mCherry的黑腹果蝇胚胎。报告基因的表达与心脏中的内源性Hand表达相似,在整个胚胎发育过程中的成心细胞和围心细胞中持续表达。即使是如此明亮的样品,Dynamics Profiler也能获得可靠的FCS数据,并可比较不同细胞中的分子浓度。​

传统荧光预览图(左)和Z轴序列(中);随后在同一系统对同一胚胎进行的后续Dynamics Profiler测量(右)。左侧的图片和数据表显示了五个不同点的测量结果。

核仁边界分子扩散测量

确定核仁边界的动态变化​

核仁边界分子扩散测量

样品由P. Hemmerich和T. Ulbricht(德国耶拿莱布尼茨老龄化研究所影像中心)友情提供。​

样品由P. Hemmerich和T. Ulbricht(德国耶拿莱布尼茨老龄化研究所影像中心)友情提供。​

确定核仁边界的动态变化​

共聚焦预览图显示了在瞬时共表达四聚体EGFP和单体红色荧光蛋白标记的核仁蛋白Fibrillarin的U-2 OS活细胞中,使用Dynamics Profiler在核仁边界进行的检测。​

地热图:位置1(右上)和位置2(右下)内的分子非对称扩散检测。测定了核仁边界EGFP的分子动力学信息。​

图示:在位置1(左)和位置2(右)内,以Airyscan内侧的检测单元沿六个角度进行互相关分析,来测算分子非对称扩散

斑马鱼血管流体测量

测量斑马鱼幼鱼血管中分子的流速​

斑马鱼血管流体测量

由德国莱布尼茨老龄化问题研究所Fritz Lipmann Institute(FLI)的V.Hopfenmüller提供​

由德国莱布尼茨老龄化问题研究所Fritz Lipmann Institute(FLI)的V.Hopfenmüller提供​

测量斑马鱼幼鱼血管中分子的流速​

利用Airyscan检测器提供的空间信息可以分析确定血液中分子的流速。将四甲基罗丹明标记的葡聚糖(10 kDa,Dynamics Profiler测量)和荧光素标记的葡聚糖(40 kDa,标记血管)注射到包埋在1%低熔点琼脂糖中的5日龄斑马鱼幼鱼血管中。 ​

参考图像和Dynamics Profiler数据由搭载Airyscan 2技术的LSM 980获取。该设备在两个不同位置测量了荧光分子流经血管的方向和速度。右侧图表显示了在位置1测量的相关曲线:所选角度的相关性曲线(上图)、沿三个轴的6组互相关分析的实际流速和方向结果(下图)。

下载​

    • ZEISS Dynamics Profiler

      Your Easy Access to Underlying Molecular Dynamics in Living Samples

      页: 6
      文件大小: 2 MB
    • ZEISS Dynamics Profiler

      Your Easy Access to Underlying Molecular Dynamics in Living Samples

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