ZEISS Elyra 7 avec Lattice SIM²
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ZEISS Elyra 7 avec Lattice SIM²

L'imagerie du vivant à la résolution sans précédent

Le microscope à super-résolution Elyra 7 dépasse la limite de la diffraction rencontrée dans la microscopie conventionnelle : grâce à Lattice SIM², doublez la résolution SIM conventionnelle et distinguez les structures sub-organites les plus fines, même séparées d'à peine 60 nm. Finies, les concessions sur la résolution pour l'imagerie à grande vitesse en n'utilisant que l'exposition minimale nécessaire à l'observation du vivant. Elyra 7 vous permet de combiner une imagerie en super-résolution et hautement dynamique, sans préparation spécifique des échantillons et sans connaissances spécialisées de techniques complexes de microscopie.

  • Résolvez des structures jusqu'à 60 nm.
  • Observez la dynamique des cellules vivantes jusqu'à 255 ips.
  • Accélérez l'acquisition d'images dans les trois dimensions.
  • Obtenez des sectionnements optiques d'une netteté sans égale en microscopie à champ large.
  • Utilisez une multitude de techniques d'imagerie sur une seule plateforme.
Projection codée en couleur de cellules COS-7 marquées par immunofluorescence avec l'anti-alpha-tubuline Alexa 488.

Projection codée en couleur de cellules COS-7 marquées par immunofluorescence avec l'anti-alpha-tubuline Alexa 488.

Projection codée en couleur de cellules COS-7 marquées par immunofluorescence avec l'anti-alpha-tubuline Alexa 488.

Ces images démontrent les excellentes capacités de sectionnement de l'algorithme de reconstruction d'image SIM².

Objectif : Plan-Apochromat 100× / 1,57 huile

Une excellente résolution grâce au Lattice SIM²

Doublez la résolution SJM traditionnelle grâce au SIM², un nouvel algorithme de reconstruction d'image qui porte la technologie SIM à un niveau supérieur. Lattice SIM² est doté d'une suppression exceptionnelle de la lumière hors foyer et permet d'obtenir les sectionnements optiques les plus nets en microscopie à champ large, même pour des échantillons fortement diffus. La reconstruction d'image SIM² reconstruit rigoureusement toutes les données d'acquisition basées sur l'éclairage structuré de votre Elyra 7 (avec un minimum d'artefacts) pour les échantillons vivants et fixes.

Légende : Ces images démontrent les excellentes capacités de sectionnement de l'algorithme de reconstruction d'image SIM².

La rapidité et l'efficacité au service de vos expériences

En doublant la résolution classique SIM, SIM² propose une imagerie fluide des spécimens vivants et fixes à des vitesses élevées allant jusqu'à 255 ips. Combinez SIM² avec les modes Burst et Leap pour rendre l'acquisition en super résolution plus rapide que jamais. Le mode SIM Apotome permet même une acquisition sans perte : pour chaque image reconstruite, une seule image brute est nécessaire ! Avec Elyra 7 Duolink, obtenez simultanément des images de deux structures de différente coloration et utilisez les couleurs multiples pour améliorer encore la résolution.

Légende : L'imagerie en time-lapse du réticulum endoplasmique (Calreticulin-tdTomato) dans une cellule COS-7 révèle des changements structurels très dynamiques.

SMLM : Cellules A6 de Xenopus laevis (cellules épithéliales de rein).

SMLM : Cellules A6 de Xenopus laevis (cellules épithéliales de rein).

SMLM : Cellules A6 de Xenopus laevis (cellules épithéliales de rein).

La Gp120, une protéine du complexe du pore nucléaire disposée selon une symétrie octogonale, a été marquée avec du Fluor Alexa 647.

La flexibilité au service de vos travaux de recherche

Elyra 7 traite pratiquement tous les types d'échantillons, notamment les cultures cellulaires photosensibles, les C. elegans et les plantes à dispersion, ou encore les coupes de tissus d'une épaisseur jusqu'à 100 µm. Elyra 7 utilise plusieurs techniques de microscopie : Lattice SIM², SIM² Apotome, DIC champ large, SMLM et TIRF. Pour multiplier les informations sur votre spécimen, vous pouvez corréler les images d'un même échantillon acquises à l'aide de l'une ou plusieurs de ces techniques. Vous pouvez même associer Elyra 7 à de nombreux autres systèmes d'imagerie tels que LSM avec Airyscan ou la microscopie électronique à balayage dans le cadre d'un processus corrélatif.

Légende : SMLM : Cellules A6 de Xenopus laevis (cellules épithéliales de rein).

La technologie derrière l'instrument

Lattice SIM : imagerie des cellules vivantes à super résolution 3D

En mode d'acquisition Lattice SIM, la zone de l'échantillon est éclairée par un motif de points en treillis plutôt que par le quadrillage de la SIM conventionnelle. Cette configuration entraîne une augmentation spectaculaire de la vitesse d'imagerie. En outre, le motif en treillis accentue le contraste pour une reconstruction d'image plus rigoureuse. La performance d'échantillonnage de l'éclairage en treillis étant 2 fois plus élevée que celle de la SIM classique, la dose de laser nécessaire pour éclairer l'échantillon est réduite. Grâce à cet éclairage en treillis, la SIM est une technique de choix pour l'imagerie des cellules vivantes. L'efficacité photonique grandement améliorée de l'éclairage en treillis augmente la vitesse d'imagerie en élevant le contraste et en diminuant le dosage laser.

Les images de cellules COS-7 colorées avec l'anti-alpha-Tubuline Alexa fluor 488 ont été traitées avec les algorithmes SIM conventionnels basés sur le filtre de Wiener généralisé et avec la nouvelle reconstruction SIM². Les images montrent une amélioration de la résolution pour SIM² par rapport à SIM. Objectif : Plan-Apochromat 63× / 1.4 huile.
Les images de cellules COS-7 colorées avec l'anti-alpha-Tubuline Alexa fluor 488 ont été traitées avec les algorithmes SIM conventionnels basés sur le filtre de Wiener généralisé et avec la nouvelle reconstruction SIM². Les images montrent une amélioration de la résolution pour SIM² par rapport à SIM. Objectif : Plan-Apochromat 63× / 1.4 huile.

Images of Cos-7 cell stained with anti-alpha-Tubulin Alexa fluor 488 were processed with the conventional SIM algorithms based on generalized Wiener filter and with the novel SIM² reconstruction. The images show an improvement of resolution for SIM² compared to SIM. Objective: Plan-Apochromat 63× / 1.4 Oil.

Images of Cos-7 cell stained with anti-alpha-Tubulin Alexa fluor 488 were processed with the conventional SIM algorithms based on generalized Wiener filter and with the novel SIM² reconstruction. The images show an improvement of resolution for SIM² compared to SIM. Objective: Plan-Apochromat 63× / 1.4 Oil.

SIM² : Doublez votre résolution SIM

SIM² est le nouvel algorithme révolutionnaire de reconstruction d'image qui augmente la résolution et la qualité du sectionnement optique des données de microscopie à éclairage structuré. SIM² est compatible avec tous les modes d'imagerie SIM de votre Elyra 7 et entièrement intégré au logiciel ZEN.

Contrairement aux algorithmes de reconstruction classiques, SIM² reconstruit l'image en deux étapes. Tout d'abord, une combinaison d'ordres, une réduction du bruit et un filtrage de suppression de fréquence sont effectués. Tous les effets résultant de ces manipulations d'images numériques sont traduits en une fonction d'étalement du point (PSF) numérique SIM. La déconvolution itérative subséquente utilise ce même PSF. Tout comme les avantages liés à l'utilisation du PSF expérimental pour la déconvolution des données de microscopie matérielle, l'algorithme SIM² est supérieur aux méthodes conventionnelles de reconstruction d'image en une seule étape pour la résolution, le sectionnement et la rigueur.

Architecture des complexes synaptonémaux à triple marquage à partir de testicules de souris, visualisée par immunomarquage de SYCP3 avec SeTau647, SYCP1-C avec Alexa 488 et SYCP1-N avec Alexa 568 et en mode Lattice SIM².
Architecture des complexes synaptonémaux à triple marquage à partir de testicules de souris, visualisée par immunomarquage de SYCP3 avec SeTau647, SYCP1-C avec Alexa 488 et SYCP1-N avec Alexa 568 et en mode Lattice SIM². Marie-Christin Spindler, AG Prof Ricardo Benavente, Biocenter of the University of Würzburg.
Marie-Christin Spindler, AG Prof Ricardo Benavente, Biocenter of the University of Würzburg.
 Marie-Christin Spindler, AG Prof Ricardo Benavente, Biocenter of the University of Würzburg.
Marie-Christin Spindler, AG Prof Ricardo Benavente, Biocenter of the University of Würzburg.

Architecture of threefold labeled synaptonemal complexes from mouse testis visualized via immunolabeling of SYCP3 with SeTau647, SYCP1-C with Alexa 488 and SYCP1-N with Alexa 568 and Lattice SIM² mode.

Imagerie à super résolution multicolore pour échantillons à coloration conventionnelle

Lattice SIM² permet de réaliser une imagerie multicolore avec une résolution pouvant aller jusqu'à 60 nm pour des échantillons à coloration conventionnelle. En raison de sa petite taille, l'imagerie en trois couleurs du complexe synaptonémique n'était auparavant possible qu'avec des méthodes complexes, comme l'imagerie à super résolution d'échantillons triplement dilatés. Lattice SIM² résout les deux brins de SYCP3 (éléments latéraux) ainsi que SYCP1-C (extrémité C-terminale des filaments transversaux) sans traitement spécial de l'échantillon ni coloration pour des distances bien inférieures à 100 nm. Plus encore, l'image tricolore fournit des informations structurelles sur les distances entre les protéines SYCP3 et SYCP1. Même au sein de la protéine SYCP1, les différentes extrémités N- et C- marquées peuvent être clairement séparées avec une résolution de moins de 50 nm entre les deux marqueurs.

Je me souviens des premiers résultats. J'en étais si étonné que j'en ai ri. Ma réaction suivante a été d'envoyer un courriel à certains des principaux utilisateurs qui pourraient en bénéficier immédiatement. Qu'il s'agisse des neurobiologistes cellulaires, des immunologistes cellulaires et moléculaires, ou de ceux qui travaillent avec des levures ou des bactéries, tous tirent déjà profit de SIM².

Peter O'Toole

Chef du service d'imagerie et de cytométrie, Université de York

SIM² Apotome : Comparaison d'images en champ large et d'images planes SIM² Apotome de cellules COS-7 colorées pour les microtubules (anti-alpha-tubuline Alexa Fluor 488, vert) et les noyaux (Hoechst, bleu). Objectif : LD LCI Plan-Apochromat 25× / 0,8 Imm Corr.
SIM² Apotome : Comparaison d'images en champ large et d'images planes SIM² Apotome de cellules COS-7 colorées pour les microtubules (anti-alpha-tubuline Alexa Fluor 488, vert) et les noyaux (Hoechst, bleu). Objectif : LD LCI Plan-Apochromat 25× / 0,8 Imm Corr.
SIM² Apotome : Comparaison d'images en champ large et d'images planes SIM² Apotome de cellules COS-7 colorées pour les microtubules (anti-alpha-tubuline Alexa Fluor 488, vert) et les noyaux (Hoechst, bleu). Objectif : LD LCI Plan-Apochromat 25× / 0,8 Imm Corr.

SIM Apotome : sectionnement optique flexible

SIM Apotome
L'imagerie de cellules vivantes avec un système à champ large souffre souvent d'un problème de flou hors foyer ou de signal de fond. Ces effets peuvent diminuer le contraste et la résolution de vos images. Le mode d'acquisition SIM Apotome d'Elyra 7 utilise un éclairage structuré pour offrir un sectionnement optique rapide avec un contraste net et une haute résolution latérale et axiale.

SIM² Apotome
Associé à l'algorithme de reconstruction SIM², le mode d'acquisition SIM Apotome permet désormais de fluidifier l'imagerie rapide des cellules vivantes avec un contraste et une résolution élevés. Vous pouvez aussi utiliser la nouvelle vitesse de sectionnement optique pour augmenter votre productivité lors de l'acquisition de grandes surfaces d'échantillons ou de grands volumes à différents grossissements.

Plus de possibilités

Image 3D PAINT de membranes mitochondriales dans les BSC1 (cellules épithéliales rénales).

Image 3D PAINT de membranes mitochondriales dans les BSC1 (cellules épithéliales rénales).

Image 3D PAINT de membranes mitochondriales dans les BSC1 (cellules épithéliales rénales).

La protéine de la membrane externe Tomm20 a été marquée en utilisant le brin d'imagerie Ultivue - I2-650. Le codage PSF remodelé pour l'information Z a été utilisé pour créer une image 3D PAINT d'une profondeur de 1,4 µm.

Objectif : alpha Plan-Apochromat 63× / 1,46 huile

Image 3D PAINT de membranes mitochondriales dans les BSC1 (cellules épithéliales rénales).

Microscopie de localisation de molécules uniques

Imagerie 3D à résolution moléculaire

Dans la microscopie de localisation de molécules uniques (SMLM), les molécules fluorescentes sont activées de manière éparse, de sorte qu'une seule d'entre elles se trouve à l'état actif dans une fonction d'étalement du point (PSF). Cette technique permet de déterminer le centre de gravité avec une précision de localisation qui dépasse de loin l'extension de la PSF. Une fois enregistrée, la molécule est désactivée et le cycle d'activation/désactivation est répété jusqu'à ce que toutes les molécules soient saisies. Les emplacements sont tracés dans une nouvelle image pour créer une image à super résolution. Avec Elyra 7, obtenez une résolution latérale de 20 à 30 nm avec les techniques SMLM telles que PALM, dSTORM et PAINT. Le logiciel ZEN reconstruira sans problème l'image de vos données.

En outre, Elyra 7 vous propose un mode SMLM 3D basé sur la technologie PRILM. La PSF est remodelée pour coder la position Z. Tout en acquérant un seul plan, vous obtenez ainsi des informations volumiques d'une profondeur de 1,4 µm avec une résolution axiale de 50 à 80 nm. Il est donc possible d'acquérir des données 3D à partir d'une cellule entière avec une précision moléculaire constante.

  • Adaptateur de caméra sCMOS Duolink Elyra 7 pour l'acquisition simultanée de deux couleurs avec cubes de filtres d'émission intégrés à bandes passantes multiples pour une acquisition efficace des images.
    Adaptateur de caméra sCMOS Duolink Elyra 7 pour l'acquisition simultanée de deux couleurs avec cubes de filtres d'émission intégrés à bandes passantes multiples pour une acquisition efficace des images.

    Adaptateur de caméra sCMOS Duolink Elyra 7 pour l'acquisition simultanée de deux couleurs avec cubes de filtres d'émission intégrés à bandes passantes multiples pour une acquisition efficace des images.

    Adaptateur de caméra sCMOS Duolink Elyra 7 pour l'acquisition simultanée de deux couleurs avec cubes de filtres d'émission intégrés à bandes passantes multiples pour une acquisition efficace des images.

  • Une cellule COS-7 exprimant le marqueur du réticulum endoplasmique Calreticulin-tdTomato (magenta) et le marqueur mitochondrial Tomm20-mEmerald (vert), a été imagée simultanément pour deux couleurs. La vidéo montre des interactions très dynamiques entre le RE et les mitochondries.

Elyra 7 Duolink

Imagerie bicolore simultanée

L'étude d'échantillons vivants se concentre très souvent sur les interactions entre différentes protéines ou organites. L'imagerie simultanée des structures concernées est essentielle à la compréhension de ces processus hautement dynamiques. Équipez votre Elyra 7 d'un adaptateur Duolink pour faire fonctionner deux caméras sCMOS et bénéficiez des nombreux avantages de la technologie à champ large :

  • Réalisez une imagerie bicolore simultanée réelle dans l'ensemble du champ d'observation, sans retard dans l'image comme il en arrive parfois avec des technologies de balayage ou lors de l'acquisition consécutive de données provenant de différents canaux.
  • Obtenez une image instantanée en super résolution et en temps réel d'une cellule vivante entière en choisissant un faible temps d'exposition.
  • Augmentez la productivité de vos expériences sur cellules fixes en doublant la quantité d'informations obtenues sur une même durée.
  • Les deux caméras permettent d'obtenir des images combinant toutes les couleurs possibles, avec un crosstalk minimal du signal, grâce aux filtres d'émission intégrés à bandes passantes multiples.
  • Obtenez des images en quadrichromie sans procéder au changement mécanique du filtre, pour des expériences multicolores encore plus rapides.
  • Réalisez des expériences SMLM multicolores sur les deux caméras sCMOS.
Cellule U2OS exprimant Rab5-mEmerald (vert) et le marqueur de transport associé au Golgi marqué au tdTomato (magenta). Acquisition bicolore simultanée avec un temps d'exposition de 1,5 ms / phase pour un champ d'observation de 1024 × 1024 pixels (64 µm × 64 µm).

Burst Mode

Imagerie à super résolution jusqu'à 255 ips

Le mouvement diffus et surtout balistique des petites vésicules dans les cellules ne peut être saisi que lorsque l'imagerie à super résolution et à haute dynamique est possible en même temps. Avec le traitement Burst des données de time-lapse 2D, Elyra 7 est capable de générer des images de super résolution à 255 Hz dans un grand champ d'observation, et même d'acquérir deux couleurs simultanément dans les modes d'acquisition Lattice SIM et SIM Apotome.

Cellule U2OS exprimant la calréticuline-tdTomato pour la visualisation du réticulum endoplasmique. La série temporelle montre une projection d'intensité maximale de l'ensemble des données de volume.

Leap Mode

Sectionnement numérique trois fois plus rapide

Leap Mode d'Elyra 7 triple la vitesse d'imagerie en volume et diminue simultanément le dosage de la lumière sur votre échantillon. Parallèlement à une capture des détails les plus fins, le volume entier (18 plans) de la cellule U2OS exprimant la Calréticuline-tdTomato a été imagé à une vitesse de 38 volumes/min en mode d'acquisition Lattice SIM. Pour le mode d'acquisition SIM Apotome, vous pouvez compter sur une vitesse d'imagerie en volume jusqu'à trois fois supérieure.

Applications

ZEISS Elyra 7 en action

  • L'image Lattice SIM² des cellules COS-7 marquées à la phalloïdine Alexa 488 a été acquise avec un objectif Plan-Apochromat 100× / 1,57 huile. Projection de l'intensité maximale de la pile Z.
  • Cellules COS-7 marquées par immunofluorescence avec de l'anti-alpha-tubuline Alexa 488, représentées en projection codée en couleur.
  • L'image Lattice SIM² des cellules COS-7 marquées à la phalloïdine Alexa 488 a été acquise avec un objectif Plan-Apochromat 100× / 1,57 huile. Projection d'intensité maximale de la pile Z.
    L'image Lattice SIM² des cellules COS-7 marquées à la phalloïdine Alexa 488 a été acquise avec un objectif Plan-Apochromat 100× / 1,57 huile. Projection d'intensité maximale de la pile Z.

    L'image Lattice SIM² des cellules COS-7 marquées à la phalloïdine Alexa 488 a été acquise avec un objectif Plan-Apochromat 100× / 1,57 huile. Projection d'intensité maximale de la pile Z.

    L'image Lattice SIM² des cellules COS-7 marquées à la phalloïdine Alexa 488 a été acquise avec un objectif Plan-Apochromat 100× / 1,57 huile. Projection d'intensité maximale de la pile Z.

  • Cellules COS-7 marquées par immunofluorescence avec de l'anti-alpha-tubuline Alexa 488, représentées en projection codée en couleur.
    Cellules COS-7 marquées par immunofluorescence avec de l'anti-alpha-tubuline Alexa 488, représentées en projection codée en couleur.

    Cellules COS-7 marquées par immunofluorescence avec de l'anti-alpha-tubuline Alexa 488, représentées en projection codée en couleur. Cette image démontre les excellentes capacités de sectionnement de l'algorithme de reconstruction d'image SIM². Objectif : Plan-Apochromat 63× / 1.4 huile

    Cellules COS-7 marquées par immunofluorescence avec de l'anti-alpha-tubuline Alexa 488, représentées en projection codée en couleur. Cette image démontre les excellentes capacités de sectionnement de l'algorithme de reconstruction d'image SIM². Objectif : Plan-Apochromat 63× / 1.4 huile

Étude des composants du cytosquelette

En raison de la fine structure des composants du cytosquelette, par exemple le réseau d'actine ou les filaments microtubulaires, l'imagerie portant bien en dessous de 100 nm est souvent réalisée avec des techniques de super résolution. Par rapport aux techniques SIM classiques, Lattice SIM² donne beaucoup plus d'informations structurelles à partir de vos échantillons. Non seulement il utilise une résolution portant jusqu'à 60 nm, mais il offre également une qualité de sectionnement nettement améliorée.

  • L'imagerie simultanée du réticulum endoplasmique (Calreticulin-tdTomato, magenta) et des microtubules (EMTB-3xGFP, vert) dans une cellule COS-7 révèle une interaction très dynamique de ces organites. Objectif : Plan-Apochromat 63× / 1.4 huile
  • Cellule U2OS vivante exprimant Tomm20-mEmerald imagée en 3D avec un pas de 110 nm. Objectif : Plan-Apochromat 63× / 1.4 huile
  • L'imagerie simultanée du réticulum endoplasmique (Calreticulin-tdTomato, magenta) et des microtubules (EMTB-3xGFP, vert) dans une cellule COS-7 révèle une interaction très dynamique de ces organites. Objectif : Plan-Apochromat 63× / 1.4 huile.
  • Cellule U2OS exprimant Tomm20-mEmerald. Objectif : Plan-Apochromat 63× / 1.4 huile.

Comprendre les processus biologiques

Grâce à son éclairage structuré en treillis unique, Elyra 7 combine une imagerie à grande vitesse avec une efficacité lumineuse incroyable, un faible dosage de photons et une grande sensibilité. Observez des structures cellulaires, subcellulaires et même sub-organites de spécimens vivants en 2D et 3D au fil du temps. Que vous vous intéressiez à la dynamique du mouvement des mitochondries, à la fusion et à la fission ou au bourgeonnement du réticulum endoplasmique, le mode Lattice SIM² d'Elyra 7 offre la compatibilité nécessaire pour examiner les cellules vivantes en super résolution.

  • Cellules LLC PK1 exprimant H2B-mCherry (magenta) et α-tubuline mEmerald-GFP (vert). Données présentées sous forme de projection d'intensité maximale de 12 plans sur une profondeur de 3,7 µm. La grande sensibilité de l'Elyra 7 permet de capturer les images de l'ensemble du champ d'observation tout au long de la mitose. Objectif : LD LCI Plan-Apochromat 25× / 0,8 Imm Corr.
  • Cellules COS-7 exprimant le marqueur du réticulum endoplasmique Calreticulin-tdTomato. Données présentées sous forme de projection d'intensité maximale de 12 plans sur une profondeur de 1,4 µm. Objectif : Plan-Apochromat 40× / 1.4 huile
  • Données SIM² Apotome en time-lapse de cellules LLC PK1 exprimant H2B-mCherry (magenta) et α-Tubuline mEmerald-GFP (vert). Données présentées sous forme de projection d'intensité maximale de 12 plans sur une profondeur de 3,7 µm. Objectif : LD LCI Plan-Apochromat 25× / 0,8 Imm Corr.
  • Données SIM² Apotome en time-lapse de cellules COS-7 exprimant le marqueur du réticulum endoplasmique Calreticulin-tdTomato. Données présentées sous forme de projection d'intensité maximale de 12 plans sur une profondeur de 1,4 µm. Objectif : Plan-Apochromat 40× / 1.4 huile.

Excellente capacité de sectionnement à une vitesse incroyable

SIM² Apotome est une méthode flexible d'imagerie des cellules vivantes pour les expériences qui ne nécessitent pas la plus haute résolution spatiale, mais qui dépendent plutôt d'une excellente qualité du sectionnement optique. SIM² Apotome est très doux pour votre échantillon. Sa résolution latérale et axiale, de même que sa vitesse d'acquisition des volumes, sont supérieures à celles de la microscopie confocale classique. Les images à haut NA (1,4) et à grossissement 40× atteignent presque la résolution et les capacités de sectionnement d'un microscope SIM classique, avec une vitesse d'acquisition multipliée.

  • Image par balayage mosaïque en volume d'une fine coupe de mûrier. Données présentées sous forme de projection d'intensité maximale sur une profondeur de 11 µm. Temps d'acquisition : inférieure à 2 min. Objectif : EC Plan-Neofluar 10× / 0.3 air. Échantillon : « Maulbeere » (Mûre) de set TS-Optics Dauerpräparate Botanik 25St.
  • Image par balayage mosaïque en volume d'une coupe transversale de feuille. L'image montre une projection d'intensité maximale d'une pile Z. Temps d'acquisition : inférieure à 2 min. Objectif : EC Plan-Neofluar 10× / 0.3. Échantillon : « Leaf » (Feuille) de set TS-Optics Dauerpräparate Botanik 25St.
  • Image par balayage mosaïque en volume SIM² Apotome d'une fine coupe de mûrier avec un objectif EC Plan-Neofluar 10× / 0.3 air. Données présentées sous forme de projection d'intensité maximale sur une profondeur de 11 µm. Échantillon : « Maulbeere » (Mûre) de set TS-Optics Dauerpräparate Botanik 25St.
  • Image par balayage mosaïque en volume SIM² Apotome de la coupe transversale d'une feuille, capturée avec un objectif EC Plan-Neofluar 10× / 0.3. L'image montre une projection d'intensité maximale d'une pile Z. Échantillon : « Leaf » (Feuille) de set TS-Optics Dauerpräparate Botanik 25St.

Balayage rapide en mosaïque de très grandes surfaces

Grâce aux performances à grande vitesse de son mode d'acquisition, SIM Apotome réalise rapidement des images de très grandes surfaces par balayage en mosaïque avec une excellente qualité du sectionnement optique. Cette image d'une coupe de mûrier de 11,1 mm² × 11 µm a été réalisée en moins de 2 minutes, en utilisant l'échantillonnage de Nyquist dans les trois directions et en deux couleurs. Des vitesses similaires ont également été atteintes pour obtenir la coupe transversale d'une feuille.

  • La cellule COS-7 exprimant EMTB-3xGFP (vert) et EB3-tdTomato (magenta) montre un mouvement dynamique des microtubules. Imagerie en Lattice SIM 9 Phase Mode. Objectif : Plan-Apochromat 63× / 1.4 huile
  • La dynamique de l'actine dans une cellule COS-7 exprimant LifeAct-tdTomato a été imagée avec SIM Apotome 3D Leap Mode au fil du temps. L'image montre une projection d'intensité maximale de 30 plans sur une profondeur de 3,4 µm. Objectif : Plan-Apochromat 40× / 1.4 huile
  • La cellule COS-7 exprimant EMTB-3xGFP (vert) et EB3-tdTomato (magenta) montre un mouvement dynamique des microtubules. Imagerie en Lattice SIM 9 Phase Mode.
  • La dynamique de l'actine dans une cellule COS-7 exprimant LifeAct-tdTomato a été imagée avec SIM Apotome 3D Leap Mode au fil du temps.

Définir les besoins spécifiques en matière de rapidité et de résolution

La nécessité d'augmenter la vitesse d'imagerie et de réduire le dosage de la lumière est presque illimitée. La robustesse des modèles d'éclairage structuré de l'Elyra 7 et le logiciel de reconstruction d'image diminuent considérablement le nombre d'images de phase requises pour les modes d'acquisition Lattice SIM et SIM Apotome, sans grand impact sur la résolution. L'acquisition SIM Lattice fonctionne à 9 images de phase par trame, tandis que 3 images de phase par trame suffisent pour SIM Apotome, ce qui augmente la vitesse d'imagerie respectivement de 44 % et 66 %.

  • Cerveau murin exprimant le marqueur neuronal Thy1-eGFP, imagé en mode Lattice SIM sur une plage d'empilement Z de 75 µm.
  • Embryon de poisson zèbre exprimant un marqueur vasculaire fli1-EGFP, imagé en mode SIM Apotome sur une plage d'empilement Z de 100 µm.
  • Cerveau murin exprimant le marqueur neuronal Thy1-eGFP, imagé en mode Lattice SIM sur une plage d'empilement Z de 75 µm.
    Cerveau murin exprimant le marqueur neuronal Thy1-eGFP, imagé en mode Lattice SIM sur une plage d'empilement Z de 75 µm.  Échantillon fourni avec l'aimable autorisation de Herms Lab (MCN, Université de Munich, Allemagne)
    Échantillon fourni avec l'aimable autorisation de Herms Lab (MCN, Université de Munich, Allemagne)

    Cerveau murin exprimant le marqueur neuronal Thy1-eGFP, imagé en mode Lattice SIM sur une plage d'empilement Z de 75 µm.

    Cerveau murin exprimant le marqueur neuronal Thy1-eGFP, imagé en mode Lattice SIM sur une plage d'empilement Z de 75 µm.

  • Embryon de poisson zèbre exprimant un marqueur vasculaire fli1-EGFP, imagé en mode SIM Apotome sur une plage d'empilement Z de 100 µm.
    Embryon de poisson zèbre exprimant un marqueur vasculaire fli1-EGFP, imagé en mode SIM Apotome sur une plage d'empilement Z de 100 µm. Échantillon fourni avec l'aimable autorisation de Haass Lab (MCN, Université de Munich, Allemagne)
    Échantillon fourni avec l'aimable autorisation de Haass Lab (MCN, Université de Munich, Allemagne)

    Embryon de poisson zèbre exprimant un marqueur vasculaire fli1-EGFP, imagé en mode SIM Apotome sur une plage d'empilement Z de 100 µm.

    Embryon de poisson zèbre exprimant un marqueur vasculaire fli1-EGFP, imagé en mode SIM Apotome sur une plage d'empilement Z de 100 µm.

Résoudre les détails cachés dans la profondeur

Bien qu'Elyra 7 soit un microscope à éclairage structuré, les modes Lattice SIM² et SIM² Apotome offrent également une super résolution et des sectionnements optiques de haute qualité dans des échantillons épais ou diffus. L'association de modèles d'éclairage robustes et d'une excellente technologie de reconstruction d'image a permis d'obtenir des images d'une coupe complète de cerveau murin d'une épaisseur d'environ 80 µm exprimant le marqueur neuronal Thy1-eGFP.

  • Image 3D de Lattice SIM² d'une larve de C. elegans
  • Levure vivante exprimant un marqueur membranaire couplé à la GFP et une protéine associée au Golgi couplée au mCherry en projection d'intensité maximale. Échantillon fourni avec l'aimable autorisation de C. MacDonald, G. Calder et P. O'Toole (Département de biologie et Établissement de technologie pour les biosciences, Université de York, Royaume-Uni)
  • L'image 3D SIM² Apotome d'une feuille provenant d'un échantillon vivant de A. thaliana montre les microtubules (tubuline-GFP) dans les trois couches cellulaires supérieures. Échantillon et données reproduits avec l'aimable autorisation de G. Calder et P. O'Toole (Département de biologie et Établissement de technologie pour les biosciences, Université de York, Royaume-Uni)
  • Image d'embryon de poisson zèbre exprimant un marqueur vasculaire fli1-EGFP capturée en 3D. La figure montre la projection d'intensité maximale de l'ensemble des données de la pile Z du balayage mosaïque. Objectif : Plan-Neofluar 10× / 0.3. Échantillon fourni avec l'aimable autorisation de Haass Lab (MCN, Université de Munich, Allemagne)
  • Image 3D Lattice SIM² d'une larve de C. elegans. L'image montre une projection d'intensité maximale. Échantillon fourni avec l'aimable autorisation de Mango Lab (Université de Bâle, Suisse).
  • Images en time lapse Lattice SIM² de levure vivante exprimant un marqueur membranaire couplé à la GFP et une protéine associée au Golgi couplée au mCherry. Échantillon fourni avec l'aimable autorisation de C. MacDonald, G. Calder et P. O'Toole (Département de biologie et Établissement de technologie pour les biosciences, Université de York, Royaume-Uni).
  • L'image 3D SIM² Apotome d'une feuille provenant d'un échantillon vivant de A. thaliana montre les microtubules (tubuline-GFP) dans les trois couches cellulaires supérieures. Échantillon et données reproduits avec l'aimable autorisation de G. Calder et P. O'Toole (Département de biologie et Établissement de technologie pour les biosciences, Université de York, Royaume-Uni).
  • SIM² Apotome : Image d'embryon de poisson zèbre exprimant un marqueur vasculaire fli1-EGFP capturée en 3D. Projection d'intensité maximale de l'ensemble des données de la pile Z du balayage mosaïque. Échantillon fourni avec l'aimable autorisation de Haass Lab (MCN, Université de Munich, Allemagne).

Découvrir la diversité du vivant

Étudiez des spécimens vivants ou immobiles, petits ou grands, fins ou épais, avec les modes Lattice SIM², SIM² Apotome ou SMLM de l'Elyra 7. Que vous étudiiez la dynamique des vésicules dans les cellules ou la levure, ou que vous souhaitiez élucider l'architecture des végétaux, de C. elegans, du poisson zèbre, de D. melanogaster ou des bactéries, Elyra 7 vous fera profiter d'une imagerie à super résolution facilement accessible pour l'étude de votre organisme modèle de prédilection et de nombreux autres spécimens.

  • Images SIM² Apotome et Lattice SIM² d'un cerveau murin exprimant le marqueur neuronal Thy1-eGFP. Les images représentent le codage couleur ou les projections d'intensité maximale des données de volume.
  • Images SIM² Apotome et Lattice SIM² d'un cerveau murin exprimant le marqueur neuronal Thy1-eGFP. Les images représentent le codage couleur ou les projections d'intensité maximale des données de volume.
  • Images SIM² Apotome et Lattice SIM² d'un cerveau murin exprimant le marqueur neuronal Thy1-eGFP. Les images représentent le codage couleur ou les projections d'intensité maximale des données de volume.
  • Images SIM² Apotome et Lattice SIM² d'un cerveau murin exprimant le marqueur neuronal Thy1-eGFP. Les images représentent le codage couleur ou les projections d'intensité maximale des données de volume.
    Images SIM² Apotome et Lattice SIM² d'un cerveau murin exprimant le marqueur neuronal Thy1-eGFP. Les images représentent le codage couleur ou les projections d'intensité maximale des données de volume. Échantillon fourni avec l'aimable autorisation de Herms Lab (MCN, Université de Munich, Allemagne)
    Échantillon fourni avec l'aimable autorisation de Herms Lab (MCN, Université de Munich, Allemagne)

    Images SIM² Apotome et Lattice SIM² d'un cerveau murin exprimant le marqueur neuronal Thy1-eGFP. Les images représentent le codage couleur ou les projections d'intensité maximale des données de volume.

    Objectifs : Plan-Neofluar 10× / 0,3, Plan-Apochromat 40× / 1,4 huile et Plan-Apochromat 63× / 1,4 huile.

    Images SIM² Apotome et Lattice SIM² d'un cerveau murin exprimant le marqueur neuronal Thy1-eGFP. Les images représentent le codage couleur ou les projections d'intensité maximale des données de volume.

  • Images SIM² Apotome et Lattice SIM² d'un cerveau murin exprimant le marqueur neuronal Thy1-eGFP. Les images représentent le codage couleur ou les projections d'intensité maximale des données de volume.
    Images SIM² Apotome et Lattice SIM² d'un cerveau murin exprimant le marqueur neuronal Thy1-eGFP. Les images représentent le codage couleur ou les projections d'intensité maximale des données de volume. Échantillon fourni avec l'aimable autorisation de Herms Lab (MCN, Université de Munich, Allemagne)
    Échantillon fourni avec l'aimable autorisation de Herms Lab (MCN, Université de Munich, Allemagne)

    Images SIM² Apotome et Lattice SIM² d'un cerveau murin exprimant le marqueur neuronal Thy1-eGFP. Les images représentent le codage couleur ou les projections d'intensité maximale des données de volume.

    Objectifs : Plan-Neofluar 10× / 0,3, Plan-Apochromat 40× / 1,4 huile et Plan-Apochromat 63× / 1,4 huile.

    Images SIM² Apotome et Lattice SIM² d'un cerveau murin exprimant le marqueur neuronal Thy1-eGFP. Les images représentent le codage couleur ou les projections d'intensité maximale des données de volume.

  • Images SIM² Apotome et Lattice SIM² d'un cerveau murin exprimant le marqueur neuronal Thy1-eGFP. Les images représentent le codage couleur ou les projections d'intensité maximale des données de volume.
    Images SIM² Apotome et Lattice SIM² d'un cerveau murin exprimant le marqueur neuronal Thy1-eGFP. Les images représentent le codage couleur ou les projections d'intensité maximale des données de volume. Échantillon fourni avec l'aimable autorisation de Herms Lab (MCN, Université de Munich, Allemagne)
    Échantillon fourni avec l'aimable autorisation de Herms Lab (MCN, Université de Munich, Allemagne)

    Images SIM² Apotome et Lattice SIM² d'un cerveau murin exprimant le marqueur neuronal Thy1-eGFP. Les images représentent le codage couleur ou les projections d'intensité maximale des données de volume.

    Objectifs : Plan-Neofluar 10× / 0,3, Plan-Apochromat 40× / 1,4 huile et Plan-Apochromat 63× / 1,4 huile.

    Images SIM² Apotome et Lattice SIM² d'un cerveau murin exprimant le marqueur neuronal Thy1-eGFP. Les images représentent le codage couleur ou les projections d'intensité maximale des données de volume.

Un voyage à travers les échelles

Les échantillons biologiques contiennent souvent des informations très variées à différentes échelles de longueur. La capacité à collecter des données de basse à haute résolution dans le même échantillon augmente non seulement la productivité, mais permet aussi d'interconnecter les résultats et de les contextualiser pour obtenir une vue d'ensemble.

  • SMLM : Symétrie octuple du complexe du pore nucléaire dans la cellule A6.
  • SMLM : L'alpha tubuline a été marquée avec Alexa 555 et la bêta tubuline avec Alexa 488.
  • SMLM : Avec Elyra 7, vous pouvez obtenir une image d'une profondeur z de 1,4 µm en une seule acquisition.
  • SMLM : Symétrie octuple du complexe du pore nucléaire dans la cellule A6.

    SMLM : Symétrie octuple du complexe du pore nucléaire dans la cellule A6.

    SMLM : Symétrie octuple du complexe du pore nucléaire dans la cellule A6.

    La Gp210 a été marquée avec du Fluor Alexa 647. Image en champ large (1re rangée, à gauche), image SMLM (1re rangée, à droite) et région zoomée (2e rangée, à gauche).

    SMLM : Symétrie octuple du complexe du pore nucléaire dans la cellule A6.

  • SMLM : L'alpha tubuline a été marquée avec Alexa 555 et la bêta tubuline avec Alexa 488.

    SMLM : L'alpha tubuline a été marquée avec Alexa 555 et la bêta tubuline avec Alexa 488.

    SMLM : L'alpha tubuline a été marquée avec Alexa 555 et la bêta tubuline avec Alexa 488.

    Les deux canaux ont été acquis simultanément. Les épitopes sont occupés soit par un fluorophore vert, soit par un fluorophore rouge, comme le montre l'exclusion mutuelle entre les molécules de colorant vert et rouge.

    SMLM : L'alpha tubuline a été marquée avec Alexa 555 et la bêta tubuline avec Alexa 488.

  • SMLM : Avec Elyra 7, vous pouvez obtenir une image d'une profondeur z de 1,4 µm en une seule acquisition.

    SMLM : Avec Elyra 7, vous pouvez obtenir une image d'une profondeur z de 1,4 µm en une seule acquisition.

    SMLM : Avec Elyra 7, vous pouvez obtenir une image d'une profondeur z de 1,4 µm en une seule acquisition.

    Image 3D SMLM de l'Alexa 647 α-tubuline codée en couleur pour la profondeur.

    SMLM : Avec Elyra 7, vous pouvez obtenir une image d'une profondeur z de 1,4 µm en une seule acquisition.

Microscopie de localisation de molécules uniques (SMLM)

La SMLM englobe des techniques telles que PALM, dSTORM et PAINT. Grâce à de très puissants lasers dans le spectre visible et à la détection par double caméra, Elyra 7 permet aux chercheurs d'accéder à une large gamme de colorants, de marqueurs et de fluorophores dans presque toutes les combinaisons possibles.

  • Résoudre les structures moléculaires : la SMLM permet de cartographier les emplacements précis des protéines individuelles.
  • Déterminer les relations entre les molécules : détecter deux canaux avec une précision moléculaire.
  • Capturer l'information en trois dimensions : démêlez les relations moléculaires en z avec sérénité.

Téléchargements

    • ZEISS Elyra 7 with Lattice SIM²

      Your Live Imaging System with Unprecedented Resolution

      Pages: 29
      Taille du fichier: 7 MB
    • Super-Resolution Imaging by Dual Iterative Structured Illumination Microscopy

      Pages: 19
      Taille du fichier: 6 MB
    • ZEISS Elyra 7 and Idylle Everspark Buffer

      Streamlined experiments and reproducible results in localization microscopy

      Pages: 4
      Taille du fichier: 1 MB
    • Introducing Lattice SIM for ZEISS Elyra 7

      Structured Illumination Microscopy with a 3D Lattice for Live Cell Imaging

      Pages: 8
      Taille du fichier: 1 MB
    • ZEISS Elyra 7 с Lattice SIM² (Russian Version)

      Система визуализации живых клеток с непревзойденно высоким разрешением

      Pages: 33
      Taille du fichier: 5 MB

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