Kryo-FIB-SEM

Bei der FIB-SEM werden Proben zunächst mit dem SEM abgebildet. Anschließend schneidet ein fokussierter Ionenstrahl eine dünne Schicht von 3–10 nm ab. Dann wird die Probe sequenziell erneut abgebildet. Die sehr kleine Schrittweite in Z-Richtung kann anhand der XY-Auflösung des SEM für isotropes 3D-Imaging kalibriert werden. Damit eignet sich die FIB-SEM ideal für präzise 3D-Messungen. Die herkömmliche chemische Fixierung von Zellen oder Gewebe für die Elektronenmikroskopie kann jedoch die Ultrastruktur verändern. Die Kryofixierung bewahrt die Probe in einem nahezu nativen Zustand. So kann mit der Kryo-FIB-SEM, bei der die niedrige Temperatur der Probe beibehalten wird, eine nahezu native 3D-Momentaufnahme der zellulären Ereignisse in der Probe in ultrahoher Auflösung aufgenommen werden. Auch die Kombination mit anderen Kryomethoden ist möglich, z. B. Licht- und Konfokalmikroskopie.