Das Modul „Autoimmersion“ für ZEISS Axio Observer 7​

eGFP‑exprimierende HEK-KO-PEX5-Zellen mit einem „gecageten“ Peroxisom-Zielsignal vom Typ 1 wurden mit dem Peroxisom-Importrezeptor PEX5 rekonstituiert. Eine lichtinduzierte Konformationsänderung des Photocages bewirkt die Exposition des Peroxisom-Zielsignals. Wird WT-PEX5 exprimiert, kann die Akkumulation des eGFP‑Signals in den gepunkteten Peroxisomen überwacht werden (obere Reihe). Beim mutierten PEX5 (untere Reihe) war selbst nach 18 Stunden kein Peroxisom-Import erkennbar.

Bei der Arbeit mit Lebendproben können Sie sich nie völlig sicher sein, wann das interessierende Ereignis tatsächlich eintritt. Um die Aufnahme von Nanopartikeln durch Makrophagen im Bild festzuhalten, werden zahlreiche Positionen auf einer Multiwellplatte sowie mehrere Z‑Ebenen über mehrere Stunden bei 37 °C mit Re‑Immersion erfasst. Die oben abgebildete Region ist eine Teilmenge des deutlich größeren Datensatzes, der mit automatisiertem Imaging erfasst wurde. Die Abbildung zeigt die Absorption von Nanopartikeln in den Zellen (obere Reihe). Auch die Oberfläche der Zellen wurde aufgenommen, um zu verifizieren, dass die Nanopartikel sich tatsächlich innerhalb der Zellen befinden und nicht etwa auf der Zelloberfläche sitzen (untere Reihe).